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ELISA試劑盒檢測過程中的注意事項

ELISA實驗通用規(guī)則

ELISA試劑盒——會出現(xiàn)的問題及解決辦法

陰性標(biāo)準(zhǔn)品的吸光值低于陽性標(biāo)準(zhǔn)品的吸光值。

a.原因：微孔中的試劑未能充分混合。

解決辦法： 試劑加完后，需輕敲盤四周使其充分混合均勻。

b.原因：洗板過程發(fā)生問題。

解決辦法：請隨時監(jiān)控洗板過程，洗完后立即進(jìn)行下一步驟。

c.原因：添加樣品或酶標(biāo)記物的量不一致。

解決辦法：請使用已校正過的移液槍，并確保其與吸頭之間有高度密合性。

Elisa試劑盒操作步驟 

1．用蓋片鑷Elisa試劑盒將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中；

5．將Elisa試劑盒培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及細(xì)胞化學(xué)檢測。

Elisa試劑盒的注意事項

Elisa試劑盒是否滅活：加熱可滅清中補體系統(tǒng)，在較少數(shù)情況下（培養(yǎng)ES細(xì)胞，平滑肌細(xì)胞時）建議滅活，在培養(yǎng)其余細(xì)胞時不建議滅清。滅活非常容易產(chǎn)生沉淀，如必須滅活請按56℃，30 min，輕微搖晃原則操作，滅活溫度高、時間長、搖晃不均都容易產(chǎn)生沉淀。

Elisa試劑盒培養(yǎng)基：無培養(yǎng)基在結(jié)果重復(fù)性、細(xì)胞體外分化方面有優(yōu)勢，但是，仍然是培養(yǎng)液中基本的添加物，尤其是在原代培養(yǎng)或細(xì)胞生長狀態(tài)不良時，常常會先使用有的培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng)，待細(xì)胞生長旺盛后再換成培養(yǎng)液。