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洋蔥亞細胞定位培養(yǎng)電話 思特進

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發(fā)布時間:2021-05-16 08:45  






武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術研發(fā)、實驗產品研發(fā)、日化產品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產品生產平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。目的:分析增強型綠色熒光蛋白(EGFP)與蛋白激酶C-θ(PKCθ)的融合蛋白(PKCθ-EGFP)在HeLa細胞中的表達、亞細胞定位及其對細胞形態(tài)的影響。




亞細胞定位是指某種蛋白或表達產物在細胞內的具體存在部位。例如在核內、胞質內或者細胞膜上存在。GFP是綠色熒光蛋白,在掃描共聚焦顯微鏡的激光照射下會發(fā)出綠色熒光,從而可以地定位蛋白質的位置。


武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術研發(fā)、實驗產品研發(fā)、日化產品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產品生產平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。Real-TimePCR結果表明,OsSsrl基因在水稻不同不同組織中均有表達,在葉部的表達量,其次為根,在幼穗中的表達量。




幾丁質酶(chitinase)是一種能夠將幾丁質水解成N-乙酰葡糖胺的糖苷酶,廣泛存在于植物細胞中,是抗真菌防衛(wèi)反應體系的重要組成部分.該文深入分析了1種三七幾丁質酶基因PnCHI1的功能.構建PnCHI1的亞細胞定位載體,轉入洋蔥表皮細胞中瞬時表達,在激光掃描共聚焦顯微鏡下發(fā)現(xiàn)PnCHI1定位于細胞壁中.構建PnCHI1的原核表達載體,誘導并純化獲得重組蛋白,體外平板抑菌實驗結果顯示PnCHI1原核重組蛋白對尖孢鐮刀菌、茄腐鐮刀菌、輪枝鐮刀菌3種三七根腐病菌的菌絲生長具有很強的抑制活性.采用反向遺傳學技術驗證PnCHI1的功能,通過根癌農介導將PnCHI1轉入中過量表達.qRT-PCR分析結果表明PnCHI1在T2代轉基因中大量表達,同時葉片接種實驗顯示PnCHI1轉基因對茄腐鐮刀菌的抗性增強明顯.結論:PnCHI1是定位于細胞壁的幾丁質酶,體外能抑制幾種三七根腐病真菌,在過表達大大提高了對茄腐鐮刀菌的抗性,推測PnCHI1是三七中參與根腐病防衛(wèi)反應的重要抗病基因.


武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術研發(fā)、實驗產品研發(fā)、日化產品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產品生產平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。2、MTR_8g079250的組織表達構建PMTR_8g079250::GUS融合表達載體,通過農發(fā)根轉化的方式轉入蒺藜苜蓿根部,經(jīng)培養(yǎng)后,進行GUS染色觀察。





F-box蛋白通過在UPP(泛素-蛋白酶體途徑)中特異識別底物蛋白而參與細胞周期調控、轉錄調控、細胞凋亡、信號轉導等生命活動。很多研究結果表明F-box蛋白通過SCF復合體調節(jié)多種的信號轉導途徑,如IAA、JA、GA和乙烯的信號傳導,并且與植物對非生物脅迫的響應有很大的關系。故其對植物抗逆性研究有重要意義。鷹嘴豆是世界第三大豆類作物,主要生長在干旱和半干旱地區(qū)。它具有生育期短,基因組小的特點。經(jīng)過長時間的進化和對不良環(huán)境的適應,鷹嘴豆具有了豐富的耐旱、耐低溫和耐鹽堿等抗逆基因,因此具有其自身的優(yōu)勢來研究植物的抗逆機制。其保守的WRKY結構域能與下游基因啟動子W-box特異性結合,從而調控下游基因的表達水平。目前,鷹嘴豆在分子生物學方面的研究較為少。 本研究從EST庫中挑選到兩個F-box蛋白基因在干旱脅迫下表達,采用RACE技術其全長,并對目的基因進行了初步的生物信息學分析和轉錄水平的表達譜分析,旨在為進一步揭示鷹嘴豆F-box蛋白在植物的生長發(fā)育及在逆境信號傳導中的作用奠定理論基礎。 CarF-box1基因的開放閱讀框(ORF)長1093bp,編碼一條345個氨基酸殘基的多肽,含有F-box結構域和Kelch結構域。其理論等電點為5.38,分子量為38.37kDa。CarF-box1基因不含有內含子。熒光定量PCR分析表明,CarF-box1在鷹嘴豆的根、莖、葉、花、成熟豆和成熟莢中均有表達,在花中表達極高。


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