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高效液相色譜
壓力高
壓力偏高或超過(guò)壓力上限一般是由方法問(wèn)題、誤操作、系統(tǒng)堵塞、壓力傳感器故障等問(wèn)題引起。方法問(wèn)題:在方法建立時(shí)柱溫、流速等參數(shù)建立不當(dāng),超級(jí)制備色譜儀哪個(gè)牌子好,當(dāng)使用小粒徑色譜柱或背壓大的色譜柱時(shí),可降低流速或升高柱溫(如35~40℃),以降低系統(tǒng)壓力,該問(wèn)題多發(fā)生在建立方法時(shí)。誤操作:當(dāng)壓力高于平時(shí)壓力時(shí)首先檢查柱溫是否設(shè)置錯(cuò)誤、流動(dòng)相溶劑是否使用錯(cuò)誤(如錯(cuò)將甲醇用成了粘度高的乙腈)、色譜柱是否拿錯(cuò)等誤操作。系統(tǒng)堵塞:排除方法問(wèn)題及誤操作后,排查是否系統(tǒng)堵塞,進(jìn)行分段排查,可依次松開(kāi)管路接頭,從HPLC出口端開(kāi)始,向上游泵逐個(gè)檢查,這是發(fā)現(xiàn)堵塞部位簡(jiǎn)單的方法,確定堵塞部位后可進(jìn)行直接更換(如安捷倫的過(guò)濾白頭等)、或超聲清洗(如waters的在線過(guò)濾器等)、或反沖(如六通閥、進(jìn)樣針、針座、管路等部位),如超聲清洗或反沖無(wú)效則需更換,經(jīng)排查是保護(hù)柱或色譜柱堵塞時(shí)按相關(guān)方法沖洗。壓力傳感器故障:上述排查后未發(fā)現(xiàn)壓力高原因,則需要更換壓力傳感器,超級(jí)制備色譜儀哪家質(zhì)量好,聯(lián)系儀器客服咨詢。
超級(jí)制備色譜系統(tǒng)
我想用hplc分離一個(gè)簡(jiǎn)單的多肽,我應(yīng)該選用什么樣的流動(dòng)相,還有他的梯度,還有選用什么樣的柱子
答: RP-HPLC,C18柱可以制備很少量的肽。如果用RP-HPLC,首先應(yīng)該用同類型的分析柱子分析一下多肽含多少雜質(zhì),超級(jí)制備色譜儀,設(shè)置緩緩的梯度的分離樣品,在根據(jù)分析柱子跑出的峰形,逐漸放大純化的方法。
超級(jí)制備色譜系統(tǒng)
超載、邊緣切割、中心切割、放大技術(shù)與非線性效用
在制備色譜中,超級(jí)制備色譜儀哪個(gè)生產(chǎn)廠家好,因?yàn)闆](méi)有必要達(dá)到分析色譜那樣的分離度,可以在一定范圍內(nèi)大大加大進(jìn)樣的濃度和體積。在做分離的時(shí)候,也有一些分析色譜的時(shí)候,不能用到的技巧。因?yàn)槠P(guān)系,不在這里敘述。
柱轉(zhuǎn)換技術(shù)
通過(guò)接頭或者閥門,實(shí)現(xiàn)柱子的簡(jiǎn)單延長(zhǎng),或者比較方便地實(shí)現(xiàn)對(duì)其中一個(gè)(或幾個(gè))組分的精制。
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