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時間分辨熒光微球(Time Resolved Fluorescent Microsphere)作為一種特殊的功能微球,每個微球中可包裹成千上萬個熒光分子,大大提高了熒光的標(biāo)記效率,有效提高了分析靈敏度;同時熒光微球表面修飾有合適密度的羧基或其它功能基團,用于與蛋白或的共價偶聯(lián),提高了標(biāo)記物的穩(wěn)定性。更為重要的是由于微球包埋的稀土離子已經(jīng)過了螯合,無需解離增強步驟,蕪湖pmma,因此從根本上解決了傳統(tǒng)的DELFIA法只能在液相中而不能在固相界面反應(yīng)的問題,從而解決了將時間分辨熒光應(yīng)用于層析平臺的技術(shù)瓶頸(詳情請見微測生物時間分辨熒光層析定量檢測平臺),在此基礎(chǔ)上可開發(fā)出靈敏度高于普通膠體金或有色乳膠層析方法1-3個數(shù)量級的定量檢測技術(shù)。同樣時間分辨熒光微球也可以用于微孔板超敏定量檢測技術(shù)平臺(詳情請見微測生物時間分辨熒光微孔板超敏定量檢測技術(shù)平臺),只需洗滌幾次后即可進行熒光測定,操作步驟比DELFIA簡單很多,更容易實現(xiàn)自動化操作。
蛋白質(zhì)可通過多種方式共價交聯(lián)到微球表面。微球表面含有環(huán)氧基、氯、醛基、羧基等基團,都可以和的Fc端的氨基反應(yīng),pmma微球,形成共價鍵。當(dāng)選擇共價交聯(lián)方式的時候,往往需要考慮交聯(lián)的效期、工藝復(fù)雜程度和后的帶電狀況。
種基團可以直接與蛋白的氨基反應(yīng),形成共價鍵,pmma材料,使用起來較方便,但儲存穩(wěn)定性較之羧基微球稍差。而羧基微球則需經(jīng)過EDC/NHS活化之后,pmma塑料,才與蛋白的氨基反應(yīng),形成共價鍵。由于羧基微球本身不具有直接和蛋白質(zhì)反應(yīng)的性能,因此具有較強的化學(xué)穩(wěn)定性。兩種方法各有優(yōu)缺,在選擇的時候,需根據(jù)本身的情況進行選擇。
Fluoro-Max 熒光微粒會發(fā)出明亮而清晰的顏色,相比較于背景材料,這大大提高了他們的對比度與可見度。這些內(nèi)部染色的聚合物粒子利用獨有的 Firefli? 合成方法將染料吸收入聚合物基質(zhì)中,可產(chǎn)生明亮的熒光,降低光褪色的可能性,并防止染料滲濾至液體介質(zhì)中。
特點:
由聚苯乙烯 (PS) 制成,密度為 1.05 g/cm3并且折射指數(shù)為 1.59 @ 589 nm (25°C)水性懸浮液中含 1% 固體這些微??捎寐渖錈晒怙@微鏡、共聚焦顯微鏡、熒光計、熒光分光光度儀或熒光激分類儀進行檢測也可采用礦石燈或黑色光 (UV) 進行檢測
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