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購(gòu)買的HPLC柱驗(yàn)收測(cè)試時(shí)柱壓過高,請(qǐng)問為什么?
柱壓過高是HPLC柱用戶很常碰到的問題。其原因有多方面,而且常常并不是柱子本身的問題,您可按下面步驟檢查問題的起因:
①拆去保護(hù)預(yù)柱,看柱壓是否還高,否則是保護(hù)柱的問題,若柱壓仍高,再檢查;
②把色譜柱從儀器上取下,看壓力是否下降,否則是管路堵塞,需清洗,若壓力下降,再檢查;
③將柱子的進(jìn)出口反過來(lái)接在儀器上,用10倍柱體積的流動(dòng)相沖洗柱子,(此時(shí)不要連接檢測(cè)器,以防固體顆粒進(jìn)入流動(dòng)池)。這時(shí),如果柱壓仍不下降,再檢查;只用于使用過的柱子。
④更換柱子入口篩板,若柱壓下降,說明您的溶劑或樣品含有顆粒雜質(zhì),正是這些雜質(zhì)將篩板堵塞引起壓力上升。若柱壓還高,請(qǐng)與廠商聯(lián)系。一般情況下,在進(jìn)樣器與保護(hù)柱之間接一個(gè)在線過濾器便可避免柱壓過高的問題。
高效液相色譜
高效液相色譜法是色譜法的一個(gè)重要分支,應(yīng)用范圍十分廣泛,對(duì)樣品的適用性廣,不受分析對(duì)象揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制,幾乎所有的化合物包括高沸點(diǎn)、極性、離子型化合物和大分子物質(zhì)均可用高效液相色譜法分析測(cè)定,因而彌補(bǔ)了氣相色譜法的不足。在目前已知的有機(jī)化合物中,可用氣相色譜分析的約占20% ,而80%則需用高效液相色譜來(lái)分析。HPLC具有分離效能高、分析速度快、檢測(cè)靈敏度好、能分析和分離高沸點(diǎn)且不能氣化的熱不穩(wěn)定生理活性物質(zhì)的特點(diǎn),已成為化學(xué)、醫(yī)學(xué)、工業(yè)、農(nóng)學(xué)、商檢和法檢等學(xué)科領(lǐng)域中重要的分離分析技術(shù)應(yīng)用。
HPLC的各系統(tǒng)
概括HPLC是有五大系統(tǒng)構(gòu)成:動(dòng)力系統(tǒng),進(jìn)樣系統(tǒng),分離系統(tǒng),檢測(cè)系統(tǒng),數(shù)據(jù)分析和記錄系統(tǒng)構(gòu)成。
其中:
動(dòng)力系統(tǒng):泵
進(jìn)樣系統(tǒng):六通閥和進(jìn)樣針,或者自動(dòng)進(jìn)樣器
分離系統(tǒng):色譜柱
檢測(cè)系統(tǒng):檢測(cè)器,一般有紫外檢測(cè)器,熒光檢測(cè)器,示差折光檢測(cè)器,MS檢測(cè)器等等。
記錄系統(tǒng):電腦工作站等
連接這些設(shè)備的都是由一根根不銹鋼管或者PEEK管構(gòu)成。
高效液相色譜-儀器使用中應(yīng)注意的幾個(gè)問題
1、測(cè)量值S較佳的位置(即能量很強(qiáng))調(diào)節(jié):用手按住測(cè)量值鍵,逆時(shí)針方向調(diào)節(jié)至所需要的工作波長(zhǎng),記下顯示的數(shù)值大小。然后再順時(shí)針方向調(diào)至所需要的一個(gè)工作波長(zhǎng),記下顯示的數(shù)值大小。記住顯示數(shù)值大的那個(gè)調(diào)節(jié)方向,在今后工作中改變波長(zhǎng)即可選用此種方式,這樣能量較強(qiáng),波長(zhǎng)較準(zhǔn)。這是因?yàn)閭鲃?dòng)機(jī)構(gòu)機(jī)械加工組裝差別引起不一致性,所以需要找出方向。
2、紫外檢測(cè)器不要頻繁的開機(jī)、關(guān)機(jī)。