甘肅酶聯(lián)ELISA試劑盒報價信息推薦「中檢維康」

ELISA試劑盒的操作方法——雙夾心法

1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個聚乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡稱洗滌，下同）。

2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。（同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）。

3.　加酶標(biāo)：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。

4.　加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。

5.　終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。

6.　結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“ ”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

Elisa試劑盒的優(yōu)點

1．特異性強：不與其它細(xì)胞反應(yīng)。

2．重復(fù)性好：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

3．穩(wěn)定性高：實驗效果很穩(wěn)定。

4．超靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品，稀釋度和樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。

以上內(nèi)容由北京中檢維康生物技術(shù)有限公司提供，如需了解更多關(guān)于Elisa試劑盒的資訊，歡迎關(guān)注本公司網(wǎng)站。

Elisa試劑盒的注意事項

Elisa試劑盒是否滅活：加熱可滅清中補體系統(tǒng)，在較少數(shù)情況下（培養(yǎng)ES細(xì)胞，平滑肌細(xì)胞時）建議滅活，在培養(yǎng)其余細(xì)胞時不建議滅清。滅活非常容易產(chǎn)生沉淀，如必須滅活請按56℃，30 min，輕微搖晃原則操作，滅活溫度高、時間長、搖晃不均都容易產(chǎn)生沉淀。

Elisa試劑盒培養(yǎng)基：無培養(yǎng)基在結(jié)果重復(fù)性、細(xì)胞體外分化方面有優(yōu)勢，但是，仍然是培養(yǎng)液中基本的添加物，尤其是在原代培養(yǎng)或細(xì)胞生長狀態(tài)不良時，常常會先使用有的培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng)，待細(xì)胞生長旺盛后再換成培養(yǎng)液。