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蛋白質(zhì)晶體板是什么
蛋白質(zhì)晶體結(jié)構(gòu),對蛋白質(zhì)晶體用X射線衍射法解出蛋白質(zhì)分子中各原子排列的三維結(jié)構(gòu)。在晶體中各蛋白質(zhì)分子以有序的晶胞形式重復(fù)排列,其形成受蛋白質(zhì)的純度和濃度、pH值、溫度、沉淀劑等影響。由于遺傳工程、同步輻射裝置、探測和分析技術(shù)、結(jié)晶自動化等技術(shù)的飛躍進(jìn)步,已獲得的蛋白質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)從“蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫”中僅有的7個增加到。為結(jié)構(gòu)生物學(xué)的主要研究對象,對了解生物體內(nèi)蛋白質(zhì)的各種生物學(xué)功能、外界各種因子對細(xì)胞的作用、分子設(shè)計等方面提供結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。
蛋白質(zhì)晶體板技術(shù)研究
隨著人類基因組計劃的完成,近年來生物大分子的結(jié)構(gòu)與功能研究成為生命科學(xué)關(guān)注的熱點.晶體學(xué)作為結(jié)構(gòu)生物學(xué)的基礎(chǔ),培養(yǎng)出高質(zhì)量的單晶,對于蛋白質(zhì),核酸等生物大分子三維空間結(jié)構(gòu)的測定是至關(guān)重要的.文章分析和總結(jié)了蛋白質(zhì)結(jié)晶的原理,常用的結(jié)晶化方法以及促進(jìn)蛋白質(zhì)結(jié)晶化技術(shù)研究的新進(jìn)展,蛋白質(zhì)的分離純化的各種原理和方法作了簡要的概述,同時簡單的介紹了蛋白質(zhì)結(jié)晶的方法及影響因素。
蛋白質(zhì)晶體板
進(jìn)而進(jìn)行衍射得到蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)相關(guān)信息.蛋白質(zhì)結(jié)晶需要經(jīng)歷從未飽和區(qū)經(jīng)亞穩(wěn)區(qū)至形核區(qū)的形核過程以及從形核區(qū)到亞穩(wěn)區(qū)的生長成熟過程.在整個蛋白質(zhì)結(jié)晶過程中,形核過程是至關(guān)重要的一步,形核勢壘低.因而形核劑的使用對于難結(jié)晶蛋白或者起始濃度過低的蛋白質(zhì)結(jié)晶具有重要意義.隨著結(jié)構(gòu)生物學(xué)的發(fā)展,形核劑在蛋白質(zhì)結(jié)晶中的研究仍是結(jié)晶方法學(xué)領(lǐng)域的熱點問題。
蛋白結(jié)晶板
以蛋白質(zhì)晶體學(xué)為主要手段的結(jié)構(gòu)基因組學(xué)研究通常包括選靶、、表達(dá)、純化、晶體篩選與優(yōu)化、X射線衍射數(shù)據(jù)收集與結(jié)構(gòu)解析等步驟。其中,獲得滿足衍射數(shù)據(jù)收集要求的高質(zhì)量蛋白晶體是大的"瓶頸"。我們在人類細(xì)胞內(nèi)氯離子通道蛋白2(CLIC2)結(jié)構(gòu)與功能研究中發(fā)現(xiàn)用5,5'二硫雙-2-甲酸(處理,可以顯著提高CLIC2晶體質(zhì)量,成功收集了分辨率至2埃的衍射數(shù)據(jù)試劑作為一個檢測巰基化合物的經(jīng)典試劑,通常用在半胱氨酸或含量測定上。在蛋白晶體學(xué)領(lǐng)域里以獲得蛋白晶體為目的的試劑修飾例子實際并不多。我們將其應(yīng)用在蛋白結(jié)晶學(xué)領(lǐng)域,使用Ellman試劑修飾方法使蛋白晶體質(zhì)量得到有效改善。