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等溫核酸試劑盒

據(jù)介紹，RPA檢測(cè)的靈敏度很高，能夠?qū)⒑哿康暮怂?尤其是DNA)模板擴(kuò)增到可以檢出的水平，從單個(gè)模板分子得到大約1012擴(kuò)增產(chǎn)物。而且RPA還用不著復(fù)雜的樣品處理，適用于無法提取核酸的實(shí)地檢測(cè)。RPA不僅可以對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行終點(diǎn)檢測(cè)，還可以對(duì)擴(kuò)增過程進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控，甚至可以通過試紙條(側(cè)流層析試紙條LFD)讀取結(jié)果。

目前，TwistAmp? 試劑盒的擴(kuò)增子長度在500bp以內(nèi)。不過，經(jīng)過特別優(yōu)化的RPA擴(kuò)增，也可以生成更長的擴(kuò)增產(chǎn)物，或者減慢擴(kuò)增速度(便于定量)，甚至在更低的溫度下進(jìn)行反應(yīng)。

“一般來說，核酸檢測(cè)是目前準(zhǔn)確的診斷方法。”有人告訴記者，核酸檢測(cè)試劑盒出現(xiàn)假陰性，即沒有發(fā)現(xiàn)隱藏的病毒，可能與兩個(gè)方面有關(guān)。一是樣品沒有采集到。這一點(diǎn)很容易理解。例如，咽拭子采樣時(shí)人比較難受，深度不夠可能會(huì)采集不到含有病毒的樣本。但這樣的情況應(yīng)該很少發(fā)生。

另一個(gè)假陰性的原因是核酸檢測(cè)試劑盒的探針和引物質(zhì)量有波動(dòng)，特別是定量的不造成檢測(cè)的不準(zhǔn)確。換句話說，由于這一次各家核酸檢測(cè)試劑盒供應(yīng)商都是臨時(shí)啟動(dòng)，有些準(zhǔn)備不足，或是執(zhí)行規(guī)定步驟不到位，導(dǎo)致在生產(chǎn)過程中不進(jìn)行定位，或是酶活性不足，或是酶中含有抑制酶鏈反應(yīng)的重金屬離子等，都可能造成檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)假陰性。

目前市場上各家生物企業(yè)研發(fā)出的核酸檢測(cè)試劑盒已經(jīng)超過100種，但由于缺乏RNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，無法對(duì)檢測(cè)方法進(jìn)行量值傳遞和對(duì)試劑盒檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度進(jìn)行評(píng)價(jià)，好的國產(chǎn)試劑盒競爭力也無法得到證明。為此，急需研制RNA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)來評(píng)價(jià)這些病毒核酸檢測(cè)試劑盒的質(zhì)量和準(zhǔn)確度，為試劑盒檢測(cè)結(jié)果的判定提供準(zhǔn)繩。