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發(fā)布時間:2021-06-30 10:06  






雙夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。


安全性1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。4. 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。5. 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。6. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。


檢測及酶結(jié)合物的稀釋度合適(均為1:30), 方便試驗操作者準(zhǔn)確地做稀釋工作,保證實驗結(jié)果的重復(fù)性。白介素6是一種,已被證實為B細(xì)胞分化因子.它是一種形成系統(tǒng),它的生理特性,如肝細(xì)胞急性蛋白合成的誘導(dǎo)和基于和白介素3協(xié)同作用的生激等,也備受關(guān)注.并且已證實白介素-6與病理學(xué)存在穩(wěn)定的相關(guān)關(guān)系.例如,報道多種疾病的生長因子為白介素-6, 瘤細(xì)胞能合成白介素-6并表達(dá)白介素-6受體。


哺乳動物細(xì)胞溶質(zhì)中的SOD呈綠色,并且由兩種亞單位構(gòu)成,一種含有銅,另一種含有鋅(Cu/Zn-SOD)。線粒體和細(xì)菌SOD為紅紫色并含有錳(Mn-SOD)。E.coli含有Mn-SOD和Fe-SOD。為了測定SOD的活性,研究人員嘗試了許多間接的或者直接的方法,其中,NBT的間接法為常用,因為它很方便。但是,NBT法有幾個缺點,例如生成的染料水溶性差,而且會和氧化酶的還原型發(fā)生反應(yīng)。雖然cytochrome C法也常被用來做SOD檢測,但它和超氧化物反應(yīng)過于劇烈,不能測定低水平的SOD。


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