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親和柱的應用
應用:牛奶中M1的測定
(參考方法GB 541337-2010 食品安全國家標準 乳和乳制品中M1 的測定)
樣品前處理
稱取50g牛奶到具塞離心管中,在水浴中加熱到35-37℃,4000轉(zhuǎn)離心15min,除去上層乳脂,全部樣品待過柱凈化
樣品過柱凈化
1. 將親和柱(SBHL-20-0245)連接于10ml或50ml注射管下。
2. 將處理好的樣品全部通過親和柱,控制試樣以2mL/min-3mL/min穩(wěn)定的流速過柱。(注意:空氣不能通過柱體)
3. 以穩(wěn)定的流速淋洗柱子兩次,棄去全部流出液,并使2mL-3mL空氣通過柱體。
4. 洗脫,流速為1mL/min-2mL/min,收集全部洗脫液于玻璃試管中,供檢測用。
雙酚A檢測新方法——親和柱凈化-液相色譜法
雙酚A,也稱BPA,在工業(yè)上被用來合成聚碳酸酯(PC)和環(huán)氧樹脂等材料。許多科學家發(fā)現(xiàn),雙酚A會發(fā)揮類似雌素的作用擾亂人體內(nèi)的代謝過程。。我國、歐盟、美國等都禁止其用于嬰幼兒奶瓶。但目前對于雙酚A的檢測前處理僅有少量文獻報道,均采用簡單的萃取、濃縮或SPE固相萃取柱凈化。中檢維康研發(fā)團隊將專一性強、穩(wěn)定性高的層析技術(shù)應用于雙酚A檢測,力圖簡化樣品前處理,提高檢測靈敏度及凈化效果。
雙酚A親和柱能夠特異性的純化樣品中的雙酚A,將樣品溶液通過親和柱時,雙酚A鍵合在親和柱中的上。用蒸餾水將雜質(zhì)淋洗去除。將凈化、濃縮后的雙酚A從上分離下來。然后,注入HPLC或LC-MS進行測定。
親和柱親和層析原理介紹
組氨酸是具有雜環(huán)的氨基酸,每個組氨基酸含有一個咪唑基團,這個化學結(jié)構(gòu)帶有很多額外電子,對于帶正電的化學物質(zhì)有靜電引力,親和層析是利用這個原理來進行吸附的,親和配體(也就是填料)上的陽離子(一般是鎳離子)帶正電對組氨酸有親和作用。組氨酸標簽是原核表達載體上6個組氨酸的區(qū)段,這個標簽在ph8.0時不帶電,對蛋白質(zhì)的分泌,折疊,功能基本上無影響.能高度親和鎳離子,用于蛋白質(zhì)的親和純化.