基因敲除免疫疾病模型「英瀚斯」

大鼠腦缺血再灌注模型

造模方法

大鼠麻zui仰臥固定于恒溫手術(shù)臺上。將幾種不同的應(yīng)激因子在實驗全程中應(yīng)用，順序隨機，使動物不能預(yù)料刺激的發(fā)生。暴露頸總動脈頸（CCA），分離頸內(nèi)動脈（ICA）和頸外動脈（ECA）。CCA近心端結(jié)扎并另備線，ICA遠端放置微型動脈夾，在CCA靠近分叉處插入魚線，即線栓由頸內(nèi)動脈分叉處計長度為1.85±0.05cm，說明絲線頭端己到達ICA分支MCA以和大腦前動脈（ACA）的分叉處，阻斷了同側(cè)ICA和經(jīng)ACA來自對側(cè)ICA的血供，缺血1h。

手術(shù)造模圖片

病理判定圖片

實驗動物的分組

(一)分組的原則：進行動物實驗時，經(jīng)常需要將選擇好的實驗動物按研究的需要分成若干組。能改善jia亢模型大鼠甲狀腺組織病理變化,其中高劑量組甲狀腺組織結(jié)構(gòu)基本同正常組。動物分組應(yīng)按隨機分配的原則，使每只動物都有同等機會被分配到各個實驗組與對照組中去，以避免各組之間的差別,影響實驗結(jié)果，特別是進行準確的統(tǒng)計檢驗,必須在隨機分組的基礎(chǔ)上進行。

每組動物數(shù)量應(yīng)按實驗周期長短、實驗類型及統(tǒng)計學要求而定。如果是慢性實驗或需要定期處死動物進行檢驗的實驗，就要求選較多的動物，以補足動物自然和認為處死所喪失的數(shù)量，確保實驗結(jié)束時有合乎統(tǒng)計學要求的動物數(shù)量存在。

(二)建立對照組：分組時應(yīng)建立對照組。例如用一次定量放血法可造成出血，會si亡，這就符合可重復(fù)性和達到了標準化要求。1.自身對照組：是指實驗數(shù)據(jù)而言。實驗動物本身在實驗處理前、后兩個階段的各項相關(guān)數(shù)據(jù)就分別是對照組和實驗組的實驗結(jié)果，此法可排除生物間的個體差異。2.平行對照組：有正對照組和負對照組兩種。給實驗組動物某種處理，而給正對照組用同樣方法進行處理，但并不采用實驗所要求的或手段，負對照組則不給任何處理。3.具體分組時，應(yīng)避免人為因素, 隨機把所有的動物進行編號，然后令其雙數(shù)為Ａ組(實驗組),單數(shù)為B組(對照組)即可或反之。如果要分若干個組時，應(yīng)該用隨機數(shù)字表示進行完全隨機分組。

抑yu癥應(yīng)激動物模型

(一)行為絕望模型

行為絕望模型具有簡單、快速、敏感等特點，常用于抗抑郁yao物的快速篩選。小鼠懸尾實驗：懸尾小鼠為克服不正常體位而掙扎活動，但活動一定時間后，出現(xiàn)間斷性不動，顯示“絕望”狀態(tài)，多數(shù)抗抑郁藥可有效縮短小鼠的不動時間。

(二)獲得性無助模型

獲得性無助是一種當大鼠接受無法控制或預(yù)知的厭惡xing刺激后，將其放在可以逃避dian擊的環(huán)境中時，呈現(xiàn)出的逃避行為欠缺的現(xiàn)象，同時可伴有如食欲減退、體重減輕、運動性活動減少、攻擊性降低等現(xiàn)象。人類gan臟不含dan堿氧化酶，不存在dan堿缺乏問題，所以此模型不適于在發(fā)病機制上進行人類相關(guān)疾病的研究。多種臨床對抑yu癥有效的yao物和zhi療方法可逆轉(zhuǎn)“獲得性無助”現(xiàn)象。

(三)慢性不可預(yù)見性應(yīng)激模型

大鼠經(jīng)歷一系列嚴重的應(yīng)激因子(如噪聲、強光刺激、長時間行為限制等)后表現(xiàn)出活動能力下降。小鼠懸尾實驗：懸尾小鼠為克服不正常體位而掙扎活動，但活動一定時間后，出現(xiàn)間斷性不動，顯示“絕望”狀態(tài)，多數(shù)抗抑郁藥可有效縮短小鼠的不動時間。將幾種不同的應(yīng)激因子在實驗全程中應(yīng)用，順序隨機，使動物不能預(yù)料刺激的發(fā)生。主要模擬了人類yi郁的核心癥狀即快感缺乏，同時模擬了其他重型yi郁障礙的癥狀表現(xiàn)。如運動能力及社會交往能力下降、探索行為能力下降、qin犯攻擊能力缺陷、xing行為能力下降等。

(四)孕期應(yīng)激致子代抑郁模型

出生前暴露在應(yīng)激條件下的SD大鼠，成年期會出現(xiàn)持續(xù)的行為、神經(jīng)內(nèi)分泌和睡眠結(jié)構(gòu)等改變，如行為焦躁、HPA軸功能亢進、矛盾睡眠增加，并與血漿皮質(zhì)酮水平高度相關(guān)。在睡眠中的突出變化在很大程度上與yi郁障礙患者相似。

(五)社會挫敗模型

具代表性的是地鼠的壓抑模型，它是人為地將雄性地鼠配對飼養(yǎng)在同一環(huán)境中。兩鼠之間會有“強”、“弱”之分，在“強”鼠面前，“弱”鼠出現(xiàn)體重減輕、自主活動減少、 HPA軸及交感神經(jīng)亢奮的表現(xiàn)。這些癥狀可在一定程度上被一定劑量的抗yi郁藥反轉(zhuǎn)。

雄ji素多囊卵chao綜合征動物模型

  方法①丙酸gao丸酮造模法：選出生后9d齡雌性大鼠，按1.25mg/只的劑量經(jīng)頸背部一次性皮注射丙酸gao丸酮，21d齡斷乳后動物常規(guī)飼養(yǎng)，自由飲水和進食。Step2：注射STZ溶液：術(shù)前禁食12小時，之后進行給藥處理。模型動物70d齡起連續(xù)作涂片11d，觀察到上皮持續(xù)角化者即為造模成功。模型動物xue清中4-xiong烯二酮、總gao酮、游離gao酮、胰島素(Ins)和C-肽均顯著升高。②脫氫表雄酮造模法：選23d齡幼年雌性大鼠，按6mg/100g體重的劑量每天經(jīng)皮注射脫氫表雄酮，連續(xù)20d。注射脫氫表雄酮后，模型動物的luan巢重量顯著增加并呈多囊樣改變，對閉鎖luan泡進行顯微測量其平均直徑明顯增大。模型動物血qingT、E2和空腹血糖水平明顯升高，空腹及服糖后2h血胰島素水平顯著升高。

2 雌多囊卵chao綜合征動物模型

方法  選用未交配雌性成年大鼠，一次性注射戊酸雌二醇2mg/只，16～20d后大鼠上皮出現(xiàn)持續(xù)角化。如作的研究工作，就必須了解哪種動物是高癌種，哪種是低癌種，各種動物自發(fā)性的發(fā)生率是多少。出現(xiàn)大量閉鎖luan泡，由于正常luan泡數(shù)減少luan巢體積縮小的。xue清LH和FSH水平在10～12d時降至zui低，以后逐漸上升至56d時恢復(fù)正常。至56dluan巢呈現(xiàn)多囊樣改變，6個月后該病理改變呈漸進性發(fā)展趨勢。