仙桃spe固相萃取柱選擇推薦「碩譜生物」

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反向填充(C18,C8, HLB,NH2, CN, Phenyl)

*分析物：無極到中極性

母體：水溶性

·方法：

活化：通常在水溶性有1機(jī)溶1劑如甲1醇的作用下活化，然后與水平衡

淋洗：含0-50%極性溶劑的緩沖溶液對雜質(zhì)進(jìn)行淋洗

(c)洗脫：用極性或非極性溶劑洗脫靶物

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為何 SPE小柱操作強(qiáng)調(diào)流速？

回答： SPE小柱填料充填壓實(shí)后，形成柱床，當(dāng)溶劑流過小柱時，速度過快會引起兩個問題：一是對于粘結(jié)相填料而言，由于流速過快，使其不能充分浸潤舒展，從而使其保持活性降低；二是流速過快會使小柱形成溝槽，使其未充分浸潤，從而降低吸附填料與樣品的接觸面積，影響目標(biāo)物質(zhì)的傳質(zhì)過程，從而降低回收率。當(dāng)柱流速度為0.5-3.0 mL/min時，通常不會產(chǎn)生溝槽效應(yīng)，且溝槽的形成與柱床高度有關(guān)；當(dāng)柱流速度為0-3.分析靶物的作用時間較長，控制流速可保證良好的保留效果。

在反相-固相萃取模式中，溶劑體系的極性應(yīng)按樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的順序遞減，而溶劑體系的洗脫強(qiáng)度應(yīng)逐漸增加。要確保所選的樣本溶劑不會洗脫目標(biāo)化合物，所選的淋洗劑應(yīng)在不洗脫目標(biāo)化合物的前提下，很大限度地洗脫干擾物，所選的洗脫劑應(yīng)能恰巧完全洗脫目標(biāo)化合物。

作用機(jī)理：在許多固相萃取材料的極性表面和樣品中目標(biāo)化合物的極性官能團(tuán)之間會產(chǎn)生極性作用力。普通吸附劑極性力作用在色譜中通常稱為正相色譜吸附劑。極性力比非極性力更強(qiáng)，但比離子力更弱。常用的極性基團(tuán)有羥基，胺基，巰基等。由于非極性溶劑不能與極性固定相材料形成具有氫鍵的官能團(tuán)，因此非極性基質(zhì)環(huán)境對吸附劑和目標(biāo)化合物之間的極性作用力是有利的。結(jié)果表明，在極性作用下，樣品的固相萃取過程中，基質(zhì)主要是非極性的，如正己烷、二氯甲1烷、菜油等，而目標(biāo)化合物中多含有極性大的官能團(tuán)。

含碳量

碳量是指填料的含碳量，從側(cè)面反映了C18的修飾程度，在分離效果和目標(biāo)成分保持時間方面起著重要作用。對于相同類型的填料，高碳柱上的非極性化合物比高碳柱上的碳含量高，碳鏈增大，同時也增加了結(jié)合相的非極性作用面積。C18碳含量由不同的鍵合工藝決定，市場上C18碳含量一般在17-22%之間，也有一些特殊C18碳含量超過22%，但低于14%的C18填料。大部分樣本可以用普通碳含量的C18來解決。而C18的含碳量也并非越多越好，根據(jù)樣品性質(zhì)和純化需要選擇不同含碳量的C18，例如，極性較大的化合物在高含碳量的C18中的保留程度不如低含碳量的C18。

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均衡(Equilibrium)：去除活化溶劑為上樣創(chuàng)造合適的溶劑環(huán)境，使用的溶劑通常與樣品溶液的溶劑一致；對于離子交換柱來說，樣品在堿性化合物平衡液中經(jīng)常需要添加酸，在酸性化合物平衡液中經(jīng)常需要添加堿；保留(Retention)：樣品溶液在吸附劑作用下，吸附劑對某些化合物的作用超過了其對溶劑的作用，這一過程稱為保留。

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浸漬：上樣后，部分干擾物與目標(biāo)化合物同時被保留，因此需要加入適當(dāng)?shù)娜芤簛泶笙薅鹊厝コ蓴_物而不影響目標(biāo)化合物的保留，通常使用上樣溶劑進(jìn)行浸漬不會影響回收率，但洗脫強(qiáng)度較人的溶劑能大限度地去除干擾物，選擇淋洗液時需要在回收率和凈化效果之間找到平衡；

沖洗(沖洗)：讓有較強(qiáng)沖洗能力的溶劑通過吸附劑，打斷吸附劑與保留的化合物之間的作用力，使這些化合物與吸附劑一起流出；一般情況下，能夠正好沖洗目標(biāo)化合物的沖洗溶劑是佳選擇，此時沖洗物少，選擇沖洗液時也需要在回收率和清洗效果之間找到平衡。