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廣州碩譜生物科技有限公司固相萃取柱廠家
樣品前處理在儀器分析過程中是一個既耗時又極易引進誤差的步驟,樣品處理的好壞直接影響色譜分析的結(jié)果,固相萃取小柱又是一種用途廣泛而且越來越受歡迎的樣品前處理技術(shù),因此,為了提高分析測定效率,使用好固相萃取小柱是非常有必要
正相機制:
在許多固相萃取材料的極性表面和樣品中目標化合物的極性官能團之間會產(chǎn)生極性力。通常使用極性力的吸附劑在色譜中被稱為正相色譜吸附劑。極性力強度大于非極性力,但小于離子力強度;常用的極性基團有羥基、胺基、巰基等。
由于非極性溶劑不能與極性固定相材料形成具有氫鍵的官能團,因此非極性基質(zhì)環(huán)境對吸附劑和目標化合物之間的極性作用力是有利的。必須保證選擇的樣品溶劑不能將目標物洗脫,選擇的淋洗液應(yīng)在不洗脫目標物的前提下zui大限度地洗脫干擾物,所以洗脫液應(yīng)能恰好完全洗脫目標物。結(jié)果表明,在極性作用下,樣品的固相萃取過程中,基質(zhì)主要是非極性的,如正己烷、二氯甲1烷、菜油等,而目標化合物多含有極性較大的官能團。
固相萃取技術(shù)的復雜、難搞也是人所共知,下面列舉了一些固相萃取操作中的常見的問題及解決辦法,希望能對你的固相萃取操作有所幫助。
以下是固相萃取操作中常見的問題:
一、回收率低;
二、萃取重現(xiàn)性差;
三、凈化效果不理想;
四、SPE柱流速過低。
正相作用機理:
常見的極性固定相萃取材料包括:硅膠、氧化鋁、弗羅里硅土及含有qing基(CN)、氨基(NH2)、二醇基(2OH)的鍵合硅膠。
正相固相萃取模式下,溶劑體系的極性應(yīng)按照樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的順序逐漸升高,它們的洗脫強度也逐漸增大。SPE柱的類型SPE柱的凈化原理是根據(jù)待測化合物和雜質(zhì)在柱中填料的保留能力差異,起到分離的作用,這也是色譜的重要原理之一。必須保證選擇的樣品溶劑不能將目標化合物洗脫,選擇的淋洗液應(yīng)在不洗脫目標化合物的前提下zui大限度地洗脫干擾物,所以洗脫液應(yīng)能恰好完全洗脫目標化合物。
色譜柱清洗
常規(guī)清洗:
在儲存色譜柱之前,請使用至少20倍柱體積的不帶緩沖鹽的流動相沖洗色譜柱(去除緩沖鹽),再用更強的溶劑沖洗色譜柱(去除強保留成分,反相色譜通常使用甲1醇或乙1腈),然后使用合適的溶劑儲存色譜柱。
清洗強保留污染物:
使用如下試劑依次清洗色譜柱
20倍柱體積不帶緩沖鹽的流動相;
20倍柱體積甲1醇或乙1腈;
20倍柱體積異丙1醇;
20倍柱體積正己烷或氯1仿;
20倍柱體積甲1醇或乙1腈。
固相萃取知識
我們要分析的目標化合物必須具備下列任意一種或以上的官能團才能通過離子作用力將其從樣品溶液中分離出來:
(1)可生成陽離子的官能團(帶正電荷)
(2)可生成陰離子的官能團(帶負電荷)
而且待分析的目標化合物必須在一定的pH環(huán)境下才能呈離子化或中性化。