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小粒徑無孔單分散層析介質(zhì)用于病毒的分離純化

傳統(tǒng)的層析介質(zhì)填料都是多孔的微球，因?yàn)槎嗫孜⑶虿牧系谋缺砻娣e大，因而可以對一般生物分子分離提供較高的吸附載量。層析介質(zhì)的孔徑一般都小于2000?（通常都小于100納米）。而很多病毒顆粒的粒徑一般都大于20納米，有的甚至都超過100納米。由于體積排阻的原因，病毒顆粒無法擴(kuò)散進(jìn)入層析介質(zhì)的孔內(nèi)，因而在層析吸附病毒顆粒時只有介質(zhì)微球的外表面可以利用，孔內(nèi)表面積由于體積排阻的原因而無法吸附病毒顆粒。然而，病毒樣品中的雜質(zhì)分子一般都比病毒小，因而可以擴(kuò)散進(jìn)入層析介質(zhì)孔內(nèi)被吸附在里面。由于傳統(tǒng)層析介質(zhì)孔內(nèi)表面積遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于介質(zhì)微球外表面積，雜質(zhì)吸附往往由于孔內(nèi)表面積的存在而非常顯著，吸附洗脫時雜質(zhì)含量因而較高，病毒顆粒純化效果往往不理想。無孔層析介質(zhì)由于沒有大量只能容納雜質(zhì)進(jìn)入而病毒顆粒無法擴(kuò)散進(jìn)入的內(nèi)孔，病毒顆粒在介質(zhì)外表面的層析吸附量雖然不會有明顯變化，但樣品中的雜質(zhì)被層析吸附的量會顯著減少。因此經(jīng)無孔層析填料層析洗脫后，病毒樣品的分離純度顯著提高。

整體柱制備方法是把單體和致孔劑混合液填充到柱子中，經(jīng)過升溫產(chǎn)生聚合反應(yīng)，在反應(yīng)過程利用相分離原理形成貫穿孔結(jié)構(gòu)整體柱，由于整個柱子是一個整體，可以保持較高的孔隙率和較高的機(jī)械強(qiáng)度。由于整體柱的孔隙率大, 可以減小流動相阻力和路徑擴(kuò)散, 提高可及比表面積及病毒吸附載量，從而提高病毒的分離效率。整體柱層析已被證明是病毒及病毒類大分子比較理想的分離方法。但目前整體柱制備方法有很大的局限性，因?yàn)樵谡w柱合成過程中，其孔徑大小是通過反應(yīng)過程中相分離來決定的，而相分離容易受到溫度，反應(yīng)速度等影響，因此孔徑大小不容易控制，導(dǎo)致柱間批次的穩(wěn)定性和重復(fù)性差，而且不容易制備能滿足生產(chǎn)需求的大尺寸整體柱。這些因素是整體柱不能廣泛用于病毒的分離純化的主要原因。

抗l體的層析分離步驟基本都可以采用標(biāo)準(zhǔn)化的三步曲：步用Protein A介質(zhì)進(jìn)行抗l體捕獲和濃縮；第二步用離子交換進(jìn)行中間純化以去除多聚體，宿主蛋白等雜質(zhì)；第三步是精純?nèi)コＳ郉NA，Endotoxin,Protein A 等微量雜質(zhì)。在這三步抗l體的分離純化過程中，步的Protein A親和捕獲占據(jù)分離純化成本80%以上，也是下游分離純化的瓶頸所在。親和層析之所以成本高的主要原因：首先是Protein A 價格昂貴，其價格是普通層析介質(zhì)十幾倍；第二，Protein A使用壽命短，一般離子交換填料使用壽命多達(dá)1000次，而親和填料壽命通常在100-200次；第三，Protein A 用于抗l體的捕獲和濃縮，需要處理大體積的發(fā)酵液，而親和步驟載量往往又低于陰陽離子交換層析，使得親和層析介質(zhì)使用量比中間純化或精純的要多得多。因此，要降低抗l體的生產(chǎn)成本，解決抗l體的生產(chǎn)瓶頸關(guān)鍵在于改進(jìn)步Protein A 親和捕獲。

體制機(jī)制是園區(qū)持續(xù)發(fā)展的原動力，如今也成為園區(qū)高質(zhì)量發(fā)展的依靠和底氣。當(dāng)前，“一帶一路”交匯點(diǎn)建設(shè)、長三角區(qū)域一體化發(fā)展、自貿(mào)區(qū)建設(shè)等多重戰(zhàn)略機(jī)遇疊加，園區(qū)以實(shí)干為筆，用制度紅利為“一號產(chǎn)業(yè)”強(qiáng)鏈、延鏈、補(bǔ)鏈，助力蘇州打造世l界級生物醫(yī)l藥產(chǎn)業(yè)地l標(biāo)。年內(nèi)，產(chǎn)業(yè)規(guī)模將突破1000億元；到2025年，規(guī)模將達(dá)到2500億元，擁有上市企業(yè)50家，產(chǎn)業(yè)競爭力在全國高新區(qū)保持第l一；到2035年，將成為全球生物醫(yī)l藥產(chǎn)業(yè)發(fā)展……展開轄區(qū)生物醫(yī)l藥產(chǎn)業(yè)的發(fā)展藍(lán)圖，園區(qū)上下正一步一個腳印擘畫未來——圍繞產(chǎn)業(yè)鏈做強(qiáng)產(chǎn)業(yè)鏈，加速布局藥l物、前沿診療技術(shù)、高l端醫(yī)l療器械、公共衛(wèi)生應(yīng)急管理體系支撐產(chǎn)業(yè)、產(chǎn)業(yè)鏈配套支撐服務(wù)體系；圍繞產(chǎn)業(yè)鏈布局鏈，已吸引中國科技大學(xué)、牛津大學(xué)等31所國內(nèi)外知l名高校入駐，并集聚了中科院蘇州納米所等14家“國家隊(duì)”科研院所；圍繞產(chǎn)業(yè)鏈配置資金鏈，今年設(shè)立規(guī)模20億元的天使母基l金和規(guī)模100億元的政府引導(dǎo)基l金等；圍繞產(chǎn)業(yè)鏈部署服務(wù)鏈，率l先出臺生物醫(yī)l藥人才專項(xiàng)政策15條等配套服務(wù)政策……