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等溫核酸試劑盒
RPA的原理;
重組酶與引物結(jié)合形成的蛋白-DNA復(fù)合物,能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就會發(fā)生鏈交換反應(yīng)形成并啟動DNA合成,對模板上的目標(biāo)區(qū)域進行指數(shù)式擴增。被替換的DNA鏈與SSB結(jié)合,防止進一步替換。在這個體系中,由兩個相對的引物起始一個合成事件。整個過程進行得非???,一般可在十分鐘之內(nèi)獲得可檢出水平的擴增產(chǎn)物。
RPA技術(shù)犀利在何處
常規(guī)PCR必須經(jīng)過變性、退火、延伸三個步驟,而PCR儀本質(zhì)上就是一個控制溫度升降的設(shè)備。RPA反應(yīng)的溫度在37°C - 42°C之間,無需變性,在常溫下即可進行。這無疑能大大加快PCR的速度。此外,由于不需要溫控設(shè)備,RPA可以真正實現(xiàn)便攜式的快速核酸檢測。據(jù)介紹,RPA檢測的靈敏度很高,能夠?qū)⒑哿康暮怂幔ㄓ绕涫荄NA)模板擴增到可以檢出的水平,從單個
模板分子得到大約1012擴增產(chǎn)物。而且RPA還用不著復(fù)雜的樣品處理,適用于無法提取核酸的實地檢測。
RPA是什么?
自PCR技術(shù)誕生以來已經(jīng)有三十年了。從經(jīng)典PCR、實時定量PCR再到現(xiàn)在的數(shù)字PCR,這一技術(shù)在不斷蛻變卻從未淡出我們的視野。英國TwistDx Inc公司開發(fā)的重組酶聚合酶擴增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA),被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術(shù)。以此為基礎(chǔ)的TwistAmp? 核酸擴增產(chǎn)品,能夠在15分鐘內(nèi)進行常溫下的單分子核酸檢測。該技術(shù)對硬件設(shè)備的要求很低,特別適合用于體外診斷、獸醫(yī)、食品安全、生物防御和農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域。