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制備液相知多少
色譜分析的目的
分析色譜的目的,是分析出混合物中一個(gè)(或者幾個(gè))純物質(zhì)的含量;制備色譜的目的,是從混合物中得到純物質(zhì)。為了加快分離的時(shí)間與提高分離的效率,制備色譜的的進(jìn)樣品量很大,導(dǎo)致制備色譜柱子的分離負(fù)荷的相應(yīng)加大,也就必須加大色譜柱填料,增大制備色譜的直徑和長(zhǎng)度,使用的相對(duì)多的流動(dòng)相。然而,當(dāng)色譜柱上樣品負(fù)載加大的時(shí)候,往往導(dǎo)致柱效急劇下降而得不到純的產(chǎn)品。制備色譜,要解決容量與柱子效果之間的矛盾,對(duì)重現(xiàn)性也要考慮。從經(jīng)濟(jì)上來說。制備色譜要爭(zhēng)取少用填料,少用溶劑,要盡可能多的得到產(chǎn)品。
保養(yǎng)液相色譜的重要性
國(guó)產(chǎn)的液相色譜儀在工作了一天之后,都需要停機(jī)一夜等到第二天才可以繼續(xù)工作,可按照以下的步驟停機(jī)。關(guān)閉二次儀表;關(guān)閉檢測(cè)器電源,同時(shí)切斷柱箱溫度的檢測(cè)器電源;停止恒流泵之后切斷它的電源;用二次蒸餾水沖洗進(jìn)樣閥的進(jìn)樣孔;切斷工作室的電源,加滿盛液瓶中的流動(dòng)相,等到第二天的使用。給色譜儀蓋上防塵罩。色譜儀器是需要好幾周或者好幾個(gè)月的暫不使用,除了按照短期停機(jī)的步驟之外,還應(yīng)該拆除替代柱的導(dǎo)管,拔下總電源接線板的插頭,貯存好專門用的流動(dòng)相和樣品,擦干凈儀器,蓋上防塵罩,存放位置需干燥。
液相色譜的應(yīng)用
(1)分離混合物液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動(dòng)相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。通過與試樣預(yù)處理技術(shù)相配合,液相色譜法所達(dá)到的高分辨率和高靈敏度,可分離并同時(shí)測(cè)定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì),能夠分離復(fù)雜混合物中的微量成分。并且隨著固定相的發(fā)展,還可在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成對(duì)其的分離。
(2)生化分析由于液相色譜法具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復(fù)利用,流出組分易收集等優(yōu)點(diǎn),因而被廣泛應(yīng)用到生物化學(xué)、食品分析、藥的研究、環(huán)境分析、無機(jī)分析等各種領(lǐng)域,并已成為解決生化分析問題有前途的方法。
(3)儀器聯(lián)用液相色譜儀與結(jié)構(gòu)儀器的聯(lián)用是一個(gè)重要的發(fā)展方向。液相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)受到普遍重視,如分析氨基甲酸酯多核芳烴等:液相色譜一紅外光譜聯(lián)用也發(fā)展很快,如在環(huán)境污染分析測(cè)定水中的烴類等.使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展。
液相色譜進(jìn)行制備有什么優(yōu)點(diǎn)
以液相色譜進(jìn)行制備時(shí),分離條件溫和,分離檢測(cè)中 不會(huì)導(dǎo)致試樣被破壞,且易于回收原物。
液相色譜分離系統(tǒng)也由兩相——固定相和流動(dòng)相組成。液相色譜的固定相可以是吸附劑、化學(xué)鍵合固定相(或在惰性載體表面涂上一層液膜)、離子交換樹脂或多孔性凝膠;流動(dòng)相是各種溶劑。被分離混合物由流動(dòng)相液體推動(dòng)進(jìn)入色譜柱。根據(jù)各組分在固定相及流動(dòng)相中的吸附能力、分配系數(shù)、離子交換作用或分子尺寸大小的差異進(jìn)行分離。色譜分離的實(shí)質(zhì)是樣品分子(溶質(zhì))與溶劑(即流動(dòng)相或洗脫液)以及固定相分子間的作用,作用力的大小,決定色譜過程的保留行為。
根據(jù)分離機(jī)制不同,液相色譜可分為:液固吸附色譜、液液分配色譜、化合鍵合色譜、離子交換色譜以及分子排阻色譜等類型。