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細(xì)胞在旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)注意事項(xiàng)!
1) 如果細(xì)胞未在轉(zhuǎn)瓶中培養(yǎng),只需搖晃、刮取或胰蛋白酶處埋(見下文“胰蛋白酶處理分離細(xì)胞”)即可將細(xì)胞從細(xì)胞瓶表面分離下來(lái)。
2) 輕輕地吹打細(xì)胞(移液管上下吹打),將細(xì)胞團(tuán)吹散。
3) 取1ml 細(xì)胞懸液進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),勿讓細(xì)胞沉積在瓶底。輕輕來(lái)回轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞處于懸浮狀態(tài)。
4) 稀釋細(xì)胞,使其終濃度約為每毫升 2x105~4x105。
5) 進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),并用臺(tái)盼藍(lán)排斥試驗(yàn)進(jìn)行細(xì)胞活力檢測(cè),操作方案見下文“細(xì)胞計(jì)數(shù)”。
轉(zhuǎn)瓶細(xì)胞懸浮培養(yǎng)專用低析出硼硅玻璃培養(yǎng)瓶
什么是細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)?
轉(zhuǎn)瓶細(xì)胞懸浮培養(yǎng)專用低析出硼硅玻璃培養(yǎng)瓶
懸浮培養(yǎng)指的是一種在受到不斷攪動(dòng)或搖動(dòng)的液體培養(yǎng)基里,培養(yǎng)單細(xì)胞及小細(xì)胞團(tuán)的組織培養(yǎng)系統(tǒng),是非貼壁依賴性細(xì)胞的一種培養(yǎng)方式。某些貼壁依賴性細(xì)胞經(jīng)過(guò)適應(yīng)和選擇也可用此方法培養(yǎng)。增加懸浮培養(yǎng)規(guī)模相對(duì)比較簡(jiǎn)單,只要增加體積就可以了。深度超過(guò)5mm,需要攪動(dòng)培養(yǎng)基,超過(guò)10cm,還需要深層通入CO2和空氣,以保證足夠的氣體交換。通過(guò)振蕩或轉(zhuǎn)動(dòng)裝置使細(xì)胞始終處于分散懸浮于培養(yǎng)液內(nèi)的培養(yǎng)方法。TECH英國(guó)原裝進(jìn)口細(xì)胞懸浮培養(yǎng)用轉(zhuǎn)瓶提供自125ml到5000ml等多個(gè)規(guī)格共用戶選擇使用。
目前常見的細(xì)胞培養(yǎng)瓶的分類?
目前常見的細(xì)胞培養(yǎng)瓶的分類有哪些?
目前主流的細(xì)胞培養(yǎng)方式有貼壁細(xì)胞培養(yǎng)、懸浮細(xì)胞培養(yǎng),按照培養(yǎng)的過(guò)程狀態(tài),又可以分為靜態(tài)的細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)態(tài)的細(xì)胞培養(yǎng)!2.使用移液槍吹打重懸培養(yǎng)在靜置培養(yǎng)容器內(nèi)的細(xì)胞,使細(xì)胞懸液充分混勻。為了適配這些不同的培養(yǎng)需求,對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)耗材也不盡相同,比如細(xì)胞培養(yǎng)瓶,常見的就有歪脖培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)滾瓶和轉(zhuǎn)瓶。細(xì)胞培養(yǎng)瓶有flask(方瓶),spinner(轉(zhuǎn)瓶),rollerbottle(滾瓶),搖瓶等等。