佛山氨丙基SPE柱批發(fā)性價比出眾「多圖」

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發(fā)布時間：2021-03-20 02:14

廣州碩譜生物科技有限公司，SPE小柱，是目前國內(nèi)生產(chǎn)SPE小柱較好的生產(chǎn)廠家。氨丙基SPE柱批發(fā)

為何在 SPE操作中會出現(xiàn)流速非常慢或流速不一致，回收率較低，且平行性差？也許很多小伙伴都遇到過這樣的問題。小子選錯了，方法有問題嗎？或者填充材料的粒度分布不均勻，填充松緊度不穩(wěn)定？實際上 SPE小柱每批流速都有嚴(yán)格的質(zhì)量控制范圍，在質(zhì)量控制范圍內(nèi)的小柱可以保證穩(wěn)定的流速，超出質(zhì)量控制范圍的小柱將作為異常品處理。那么，是否可以采用一種穩(wěn)定的方法，用出廠流速測試合格

實際上還有一個很容易被大家忽視的細(xì)節(jié)也會導(dǎo)致流動速度過慢： SPE小柱在運輸過程中篩板和填料可能會發(fā)生微小的松動，導(dǎo)致空氣進入填料(一般不容易被肉眼看到)，含氣填料在氣壓下會導(dǎo)致溶劑流動緩慢。這一點大家都能理解，為什么同一批小柱子會出現(xiàn)流速不平衡的情況

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正壓除氣泡

試樣數(shù)量較少，填充量較小，人工施加正壓較為方便，可采用針筒連接接頭法進行正壓排除氣泡。

□負(fù)壓排泡

試樣量較大，填料量大，人工施加正壓不便，可用真空泵連接固相萃取裝置，負(fù)壓排出氣泡。

1.2排氣泡的時間？

在 SPE操作中，一般包括平衡活化、上樣、淋洗、洗脫四步。是否每個步驟都需要一個排氣泡？但是，一般情況下，當(dāng)填料之間有空隙時，需要排出氣泡，例如，當(dāng)平衡液被激1活后，需要排出氣泡，使溶液能更好地與填料接觸。

另外還有一個容易忽略的環(huán)節(jié)也是需要排出氣泡的，一般淋洗后需要進行抽干操作，抽干后填料間也會有空氣進入，加入洗脫液后，也是要排出氣泡的，否則大量的氣泡也會嚴(yán)重影響洗脫液的流速和洗脫效果。

在選擇固相萃取機理時，應(yīng)根據(jù)目標(biāo)化合物和干擾物的性質(zhì)考慮采用哪種萃取機理，因為許多化合物同時具有多種功能基。例如：2-萘胺是一弱堿性化合物(pKa=4.16)，它在一定 pH條件下也可呈陽離子態(tài)，同時它又具有疏水性和親水性的非極性官能團。此時，應(yīng)根據(jù)樣品基質(zhì)的具體情況，選擇有利于從干擾物中分離目標(biāo)化合物的萃取機理。當(dāng)樣品基質(zhì)中同時含有大量非極性干擾雜質(zhì)時，應(yīng)盡量避免采用非極性萃取機制，而應(yīng)采用以 pKa以下兩個 pH單位或以 pH=2.16為限的陽離子交換機制。相反，如果樣品中同時含有大量干擾雜質(zhì)陽離子，則應(yīng)調(diào)整樣品 pH值至6.16 (比 pKa 2單位高)，采用非極性萃取機制更為有利。

骨架形狀，粒徑，孔徑

硅的基質(zhì)形態(tài)一般可分為非晶態(tài)和球態(tài)。無定型C18材料具有較高的性能價格比，是初步提純的首1選。且C18具有較好的顆粒均一性、較高的柱效和分離性，但相對價格可能稍高，可作為精制的選擇。

現(xiàn)在市場上可供選擇的填料粒徑很多，中低壓備通常是為了增大上樣量，增加流速，減小壓力而選用大粒徑填料；由于可以達到較高的柱效，因此小粒徑填料更適合高1效液相或高壓制備。在選擇填料時還應(yīng)充分考慮孔徑，分子量小于5000 da時選擇孔徑(80~120 da)，而對于蛋白質(zhì)大分子分子量20000 da左右、分子量大于20000 da的樣品，通常不采用C18分離模式，采用 SEC等模式進行分離。