【廣告】
廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司主營:Gemini色譜柱,Synergi色譜柱,Luna色譜柱,美國飛諾美色譜柱,Phenomenex色譜柱等等。推薦色譜柱——HP-SAX強(qiáng)陰離子交換色譜柱(由于硅膠基質(zhì)的鍵合相只能在pH,2,7。我們不斷追求,通過自身的不斷完善,可以為您提供實(shí)驗(yàn)室和生產(chǎn)需要的化學(xué)試劑、玻璃儀器、實(shí)驗(yàn)器材和生物耗材,是全方面的實(shí)驗(yàn)室一體化采購平臺(tái)。我們本著嚴(yán)謹(jǐn)、務(wù)實(shí)、創(chuàng)新的創(chuàng)業(yè)精神,為您提供價(jià)格優(yōu)惠、質(zhì)量保證的產(chǎn)品。我們有及時(shí)的送貨服務(wù),準(zhǔn)確而快捷地滿足您的需要。創(chuàng)業(yè)的路上我們風(fēng)雨同舟,一份耕耘就有一份收獲
常見液相色譜柱性能比較。
常用的'w能柱'填料為'C18',簡稱'ODS'柱,即十八烷jigui烷鍵合硅膠填料(Octadecylsilyl,簡稱ODS)。如果非要做,可以咨詢廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司自己填裝色譜柱這一步做法幾乎可以把此色譜柱判死刑了,我們的填裝工具有什么呢。這種填料在反相色譜中發(fā)揮著極為重要的作用,它可完成gao效液相色譜大多數(shù)的分析任務(wù)。由于C18(ODS)是長鏈烷ji鍵合相,有較高的碳含量和更好的疏水性,對(duì)各種類型的生物大分子有更強(qiáng)的適應(yīng)能力
反相色譜是迄今在gao效液相色譜中應(yīng)用廣泛的技術(shù),主要是因?yàn)樗m用于分析極大多數(shù)的非極性物質(zhì)和很多的可離子化的及離子化合物。HPLC的核-殼優(yōu)勢(shì)立即改善5μm和3μm方法利用Kinetex5μm核-殼技術(shù),立即提升您當(dāng)前的3μm和5μmHPLC方法的分離度、生產(chǎn)率和靈敏度。大多數(shù)用于反相色譜的固定相都是天然的疏水物質(zhì),因此,分析物是按照它們與固定相的疏水相互作用的大小來分離的,含有疏水的機(jī)制也能以同樣的保留方式分離。
按鍵合到基質(zhì)上的官能團(tuán)可分為:
反相柱:填料是非極性的,官能團(tuán)為烷烴。推薦色譜柱——賽分GP-C18色譜柱
正相柱:填料是極性的,官能團(tuán)為,CNqing基、,NH2氨基等。推薦色譜柱——賽分正相色譜柱HP-Amino,
賽分正相色譜柱HP-Cyano等等:
離子交換鍵合相:陽離子官能團(tuán):,推薦色譜柱——HP-SCX強(qiáng)陽離子交換色譜柱
陰離子官能團(tuán):―R4N,季銨基、-氨基等。推薦色譜柱——HP-SAX強(qiáng)陰離子交換色譜柱
( 由于硅膠基質(zhì)的鍵合相只能在pH,2,7.5的范圍內(nèi)使用,而離子交換色譜要求有更寬的pH范圍,因此其基質(zhì)現(xiàn)在仍主要使用聚ben乙烯和二乙烯ben。
) 流動(dòng)相:反相色譜常用的流動(dòng)相及其沖洗強(qiáng)度如下: H2O,jia醇yi腈,乙醇,bing醇,異bing醇,si氫fu喃 常用的流動(dòng)相組成是:jia醇-H2O'和'yi腈-H2O',由于yi腈的ju毒性,通常優(yōu)先考慮'jia醇-H2O'流動(dòng)相。此外,LuxAMP色譜柱的分離能力也有助于分離取代ben丙胺的對(duì)映體。 反相色譜中,溶質(zhì)按其疏水性大小進(jìn)行分離,極性越大疏水性越小的溶質(zhì),越不易與非極性的固定相結(jié)合,所以先被洗脫下來。
流動(dòng)相的pH對(duì)樣品溶質(zhì)的電離狀態(tài)影響很大,進(jìn)而影響其疏水性,所以在分離肽類和蛋白質(zhì)等生物大分子的過程中,經(jīng)常要加入修飾性的離子對(duì)物質(zhì),常用的離子對(duì)試劑是三fuyi酸(TFA),使用濃度為0.1,,使流動(dòng)相的pH值為2,3,這樣可以有效地抑制氨基酸上α羧基的離介,使其疏水性增加,延長洗脫時(shí)間,提高分辨率和分離效果。gao效液相色譜柱是消耗品,會(huì)隨使用時(shí)間或進(jìn)樣的次數(shù)增加,出現(xiàn)色譜峰高降低,峰寬加大或出現(xiàn)肩峰,柱效下降。
完全離子化的溶質(zhì),例如強(qiáng)酸或強(qiáng)堿,其在反相鍵合相上的保留值很低,近于死時(shí)間流出,不能進(jìn)行分析。液相色譜儀的選擇液相色譜儀基質(zhì)的選擇大致遵循以下法則,硅膠基質(zhì)的填料被用于大部分的HPLC分析,尤其是小分子量的被分析物,聚合物填料用于大分子量的被分析物質(zhì),主要用來制成分子排阻和離子交換柱。根據(jù)離子對(duì)色譜的原理將一種與樣品離子電荷(A,)相反的離子(B,),稱為對(duì)離子,加入到流動(dòng)相中,使其與樣品離子結(jié)合生成弱極性的離子對(duì),即中性締合物,從而增強(qiáng)了樣品的疏水性,加大了保留值,改善了分離效果。
LuxAMP 手性液相色譜柱
色譜柱: Lux 3 μm AMP
規(guī)格: 150 x 3.0mm
貨號(hào): 00F-4751-Y0
流動(dòng)相: A:5mM 碳酸氫銨,使用氨
水調(diào)整為 pH 11
B:jia醇
流速: 0.42mL/min
溫度: 室溫
檢測(cè): MS/MS (SCIEX 4500 QTRAP)
1. 1S,2R( )-ma黃堿
2. R,R(-)-偽ma黃堿
3. S,S( )-偽ma黃堿
4. 1R,2S(-)-ma黃堿
5. R(-)-ben丙胺
6. R(-)-jia基ben丙胺
7. S( )-ben丙胺
8. S( )-jia基ben丙胺
9. ben丁胺
10. 亞jia基二氧基jia基ben丙胺
11. 亞jia基二氧基jia基ben丙胺
包含在此干擾物研究中但未采用色譜
圖顯示的化合物:
對(duì)乙酰氨基酚
阿斯匹林
(±)-氯ben那敏
ka啡因
ben海拉明
右美沙芬
布
(±)-MDA
(±)-MDEA
去氧s上腺素
去jiama黃堿
廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司主營:液相色譜柱,Kinetex色譜柱,Gemini色譜柱,Synergi色譜柱,Luna色譜柱等等。2mm、30mm、50mm)保護(hù)柱保護(hù)柱套保護(hù)柱芯液相色譜柱填料基質(zhì)1。我們不斷追求,通過自身的不斷完善,可以為您提供實(shí)驗(yàn)室和生產(chǎn)需要的玻璃耗材、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、實(shí)驗(yàn)器材、色譜耗材和生物耗材,是quan面的實(shí)驗(yàn)室一體化采購平臺(tái)。我們本著嚴(yán)謹(jǐn)、務(wù)實(shí)、創(chuàng)新的創(chuàng)業(yè)精神,為您提供價(jià)格優(yōu)惠、質(zhì)量保證的產(chǎn)品。我們有及時(shí)的送貨服務(wù),準(zhǔn)確而快捷地滿足您的需要。
GeminipH 靈活性強(qiáng)的液相色譜柱
維生素 B3
色譜柱: Gemini 3 μm C18
規(guī)格: 100 x 4.6mm
貨號(hào): 00D-4439-E0
流動(dòng)相: A:0.1% 甲酸的水溶液
流速: 0.6mL/min
溫度: 22 °C
檢測(cè): 電噴霧質(zhì)譜 (ESMS) (22 °C)
檢測(cè)器: SCIEX API 4000 系統(tǒng)
樣品: 1. 煙酰胺
2. 煙酸
TMP 和硫胺
色譜柱: Gemini 3 μm NX-C18
規(guī)格: 100 x 3.0mm
貨號(hào): 00D-4453-Y0
流動(dòng)相: A:含 10% jia醇的 25mM Na2
HPO4
(pH 7.0)
B:含 70% jia醇的 25mM Na2
流速: 0.75mL/min
檢測(cè): 熒光(激發(fā):375 nm,發(fā)射:435 nm)(室溫)
樣品: 1. TMP
2. 硫胺
手性色譜柱
蛋白質(zhì)型:
蛋白質(zhì)型手性色譜柱屬于第5種類型。樣品流出色譜柱的順序是極性較強(qiáng)組合z先被沖出,而極性弱的組份會(huì)在色譜柱上有更強(qiáng)的保留。分離依賴于疏水相互作用和極性相互作用。已經(jīng)有多種蛋白質(zhì)用于此類手性色譜柱。目前使用較多的是α-酸性糖蛋白(α-Acid Glycoprotein,AGP),人xue清白蛋白(Human Serum Albumin,HSA),牛xue清白蛋白(Bovine Serum Albumin,BSA)和卵類粘蛋白(Ovomucoid,OV)。
α-酸性糖蛋白分子由181個(gè)氨基酸殘基和40個(gè)唾液酸(sialic acid)殘基構(gòu)成。α-酸性糖蛋白分子偏酸性,等電點(diǎn)為2.7。含有兩個(gè)二硫鍵,性質(zhì)很穩(wěn)定。α-酸性糖蛋白分子可以共價(jià)鍵合到硅膠上,制成手性色譜柱,可以分離許多化合物。
α-酸性糖蛋白手性色譜柱使用的流動(dòng)相通常為pH 4-7的磷酸鹽緩沖液和很小比例的有機(jī)相。國內(nèi)色譜柱市場(chǎng)還沒有人進(jìn)行過科學(xué)統(tǒng)計(jì),連一年色譜柱銷售總量也眾說紛云,更別說國內(nèi)生產(chǎn)色譜柱所占份額了。有機(jī)相shou選異bing醇,如達(dá)不到分離要求,可以嘗試yi腈,乙醇,jia醇或四氫fu喃。有機(jī)相的改變導(dǎo)致蛋白結(jié)構(gòu)發(fā)生暫時(shí)的改變。色譜柱的負(fù)載量至關(guān)重要,典型的負(fù)載量為0.02mg/ml的濃度樣品,進(jìn)樣20μl。pH 的改變對(duì)手性選擇性起關(guān)鍵作用,尤其是胺類化合物。pH降低導(dǎo)致蛋白質(zhì)負(fù)電荷的降低,引起胺類化合物保留時(shí)間減小,然而這意味著可以減小有機(jī)相比例,使選擇性增加,峰形改善。
通過調(diào)節(jié)有機(jī)相比例仍無法達(dá)到分離效果時(shí),有時(shí)需用電荷調(diào)節(jié)劑。氧化鋁也可用于HPLC,氧化鋁微粒剛性強(qiáng),可制成穩(wěn)定的色譜柱柱床,其優(yōu)點(diǎn)是可在PH高達(dá)12的流動(dòng)相中使用。但這可能引起蛋白結(jié)構(gòu)的yong久改變,這些電荷調(diào)節(jié)劑包括丁酸、辛酸、癸酸和二jia基辛胺。有時(shí)也用到1,2 亞二醇,1,2丁醇和氯化鈉。溫度對(duì)分離也有影響,溫度增加保留時(shí)間,減小分離因子。
人xue清白蛋白(HSA)分子量為69,000,等電點(diǎn)為4.8。②存在干擾峰,解決辦法為使用較長的柱子,改換流動(dòng)相或更換選擇性好的柱子③可能柱超載,減少進(jìn)樣量。蛋白中認(rèn)為存在兩個(gè)結(jié)合位點(diǎn):華法令-氮雜普魯帕宗(warfarin-azapropazone)結(jié)合位點(diǎn)。流動(dòng)相中加入辛酸,采用人xue清白蛋白手性色譜柱可以有效分離benzodiazapine。Warfarin也用人xue清白蛋白手性色譜柱得到了分離,流動(dòng)相組成為:100mM磷酸緩沖液pH7:yi腈:異bing醇 = 84:10:6。
牛xue清白蛋白(BSA)為球型蛋白,分子量為66,000,等電點(diǎn)為4.7。D含碳量含碳量指的是硅膠表面鍵合相的比例,與比表面積和鍵合覆蓋度等有關(guān)。此蛋白為一個(gè)單氨基酸鏈,通過17個(gè)二硫鍵形成9個(gè)雙環(huán)。許多化合物通過牛xue清白蛋白手性色譜柱得到分離。牛xue清白蛋白不如α-酸性糖蛋白穩(wěn)定,一些有ji溶劑(如yi腈、jia醇)可使蛋白變性,因此使用起來要特別注意。
卵類粘蛋白由蛋清中提取,分子量為55,000。它可分離大量的胺類和酸類化合物。
蛋白手性色譜柱的載樣量均較小。影響了蛋白手性色譜柱在制備色譜中的應(yīng)用。
蛋白手性色譜柱在所有手性色譜柱中是應(yīng)用廣的色譜柱,但并不是效果z好的色譜柱。
廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司成立于2005年,位于廣州番禺區(qū),是集技術(shù)和銷售于一體的企業(yè)。聯(lián)方的創(chuàng)始人在美國紐約留學(xué),歸國創(chuàng)立了聯(lián)方。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同。中西結(jié)合的管理理念,自強(qiáng)不息、開拓進(jìn)取、勤勉擔(dān)當(dāng),致力于把聯(lián)方打造成一個(gè)百年品牌、一個(gè)z專業(yè)的一站式實(shí)驗(yàn)室采購平臺(tái),追求質(zhì)量、追求服務(wù)、追求和創(chuàng)新??茖W(xué)化、精細(xì)化、專業(yè)化。服務(wù)理念:我們有著專業(yè)的銷售及售后服務(wù)團(tuán)隊(duì),可以為您提供實(shí)驗(yàn)室建設(shè)的整套方案、有著的售前與盡心的售后服務(wù)和技術(shù)支持。我們不斷追求,通過自身的不斷完善,可以為您提供實(shí)驗(yàn)室和生產(chǎn)需要的玻璃耗材、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、實(shí)驗(yàn)器材、色譜耗材和生物耗材,是的實(shí)驗(yàn)室一體化采購平臺(tái)。我們本著嚴(yán)謹(jǐn)、務(wù)實(shí)、創(chuàng)新的創(chuàng)業(yè)精神,為您提供價(jià)格優(yōu)惠、質(zhì)量保證的產(chǎn)品。 我們有及時(shí)的送貨服務(wù),準(zhǔn)確而快捷地滿足您的需要。公司主營:Luna色譜柱,美國飛諾美色譜柱,Phenomenex色譜柱,手性色譜柱,Lux多糖類手性色譜柱等等
Synergiquan方位選擇性液相色譜柱
適用于反相分離的quan方位選擇性在反相色譜中使用多種不同的保留機(jī)制來保留和分離目標(biāo)分析物。無論是疏水性還是極性化合物, Synergi 色譜柱都能為您提供quan方位選擇性,確保分離具有挑戰(zhàn)性的復(fù)雜混合物。
Synergi Polar-RP
ben基醚聯(lián)
用于極性和芳香性混合物
醚鍵增加了ben基的芳香性同時(shí)增強(qiáng)了共軛化合物的物提供了 π-π 相互作用
極性封尾增強(qiáng)了極性化合物的保留效果
手性色譜柱的分類及應(yīng)用
迄今為止,尚沒有一種類似十八烷基鍵合硅膠(ODS)柱的普遍適用的手性柱。不同化學(xué)性質(zhì)的異構(gòu)體不得不采用不同類型的手性柱,而市售的手性色譜柱通常價(jià)格昂貴,因此如何根據(jù)化
合物的分子結(jié)構(gòu)選擇適用的手性色譜柱是非常重要的。
根據(jù)手性固定相和溶劑的相互作用機(jī)制,Irving Wainer提出了手性色譜柱的分類體系:
類:通過氫鍵、π-π作用、偶級(jí)-偶級(jí)作用形成復(fù)合物。
第2類:既有類型1中的相互作用,又存在包埋復(fù)合物。此類手性色譜柱中典型的是由纖維素及其衍生物制成的手性色譜柱。
第3類:基于溶劑進(jìn)入手性空穴形成包埋復(fù)合物。這類手性色譜柱中典型的是由Armstrong開發(fā)的環(huán)糊精型手性柱[2],另外冠醚型手性柱和螺旋型聚合物,如聚(ben基jia基jia基bing烯酸酯)形成的手性色譜柱也屬于此類。
第4類:基于形成非對(duì)映體的金屬絡(luò)合物,是由Davankov開發(fā)的手性分離技術(shù),也稱為手性配位交換色譜(CLEC)。
第5類:蛋白質(zhì)型手性色譜柱。手性分離是基于疏水相互作用和極性相互作用實(shí)現(xiàn)。
但是,隨著由于市場(chǎng)上可選擇的手性色譜柱越來越多,此分類系統(tǒng)有時(shí)很難將一些手性柱歸納進(jìn)去。