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全基因組脫氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid,DNA)的提

菌株的鑒定：對篩選得到的乳酸菌進行16S rDNA序列分析，確定其種屬。將活化好的菌液，進行菌株的全基因組脫氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid, DNA)的提取[16]，然后對基因組DNA的16S rDNA區(qū)域進行PCR擴增，上游引物27F序列5′-AGAGTTTGATCCTGGCCTCA-3′，下游引物1492R序列：5′-GGTTACCTTGTTACGACTT-3′，擴增片段為1 500 bp。PCR體系50 μL：10×buffer 5 μL；脫氧核糖核苷酸三磷酸(deoxy-ribonucleoside triphosphate, dNTP) 5 μL；上游引物(25 μmol/L)0.5 μL；下游引物(25 μmol/L)0.5 μL；Taq DNA 聚合酶(250 U)0.5 μL；模板DNA 1.5 μL ；誘導植株3個防衛(wèi)反應基因PR-1a、PR-1b、PAL和1個轉導基因NPR1的超量表達，并在處理24h后達到值，顯著降低條斑病菌對水稻植株的侵染。ddH2O 37 μL。PCR擴增條件為：95 ℃ 3 min；95 ℃ 10 s；55 ℃ 30 s；72 ℃ 1 min；72 ℃ 5 min，2～4反應步驟進行30個循環(huán)。擴增產物進行瓊脂糖凝膠電泳檢測其純度及濃度，將達到測序要求的擴增產物送至上海華大基因進行測序，將測序結果在美國國立生物技術信息中心(national center for biotechnology information, NCBI)上BLAST進行比對，并確定其種屬。

解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaci

解淀粉芽孢桿菌（Bacillus amyloliquefaciens）為芽孢桿菌屬，是一種與枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）親緣性很高的細菌。該菌為革蘭氏陽性、兼性厭氧的桿狀細菌；在自然界中分布廣泛，不但可在土壤、植物根際體表、深海水等外界環(huán)境中存在，同時在植物體內也很常見；其適生長溫度為28～30℃，適宜生長的pH6．5～7。 解淀粉芽孢桿菌的菌落在L-B培養(yǎng)基和牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上呈淡黃色不透明狀，表面粗糙，有隆起，邊緣不規(guī)則。在實際生產過程中菌株的挑選，培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)細節(jié)等都會影響菌的數量及代謝產物的分泌，不適宜的培養(yǎng)條件和配方，會導致菌株生長不良，胞外活性產物代謝量減少，這也是現階段市場上眾多“解淀粉芽孢桿菌”產品下效果參差不齊的主要原因。因此，在生產發(fā)酵過程中，應有針對性地對培養(yǎng)基營養(yǎng)、溫度、轉速及培養(yǎng)基pH值、接菌量、供氧量，光照等因素調節(jié)進行嚴格把控。解淀粉芽孢桿菌（Bacillusamyloliquefaciens）是具有廣譜抗病作用的生。

解淀粉芽孢桿菌生物制劑

解淀粉芽孢桿菌Bacillus amyloliquefaciens (Fukumoto) Priest是一種嗜溫、好氧、產芽孢的桿狀細菌，革蘭氏陽性，其生理特征多樣，在自然界中廣泛存在，對人畜無毒無害，不污染環(huán)境。在其生長過程中可以產生多種次生代謝產物和酶類，具有抑制病原真菌、細菌和病毒活性的能力。Sutyak等[22]從益生菌乳制品中分離得到1株解淀粉芽孢桿菌，其細胞的無菌上清液可以對單核細胞增生李斯特菌、鏈球菌屬及腸道加德菌產生抑菌作用，而對腸道乳酸桿菌不產生作用。

解淀粉芽孢桿菌生物制劑是以解淀粉芽孢桿菌為有效菌，經發(fā)酵和超濾濃縮膜分離加工技術制成的微生物菌劑。具有適應性強、活性高、內生傳導的特點，通過營養(yǎng)和空間位點的競爭、拮抗作用、溶菌作用，能抑制多種病原微生物生長，并具有促進作物生長、改善農產品品質、提高、改善農業(yè)生態(tài)環(huán)境等作用。產品理化性質及質量控制指標:該產品生產是通過微生物（解淀粉芽孢桿菌生Lx-11）生物發(fā)酵獲得，解淀粉芽孢桿菌分散在發(fā)酵培養(yǎng)液中，為發(fā)酵后直接利用。