ELISA試劑盒在國(guó)內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測(cè)試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)試劑盒、酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒、酶聯(lián)分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見(jiàn)的叫法是ELISA檢測(cè)試劑盒、酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒等。ELISA試劑盒自從60-70年代問(wèn)世以來(lái),得到全世界科研工作者的認(rèn)可及推崇,在歐美及中國(guó)獲得很大的推廣,尤其是國(guó)內(nèi)生化領(lǐng)域的長(zhǎng)足發(fā)展。

操作步驟1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
SOD Assay Kit-WST®使用了Dojindo自己發(fā)明的易溶于水的唑鹽:WST®-1(2-(4-碘)-3-(4-基)-5-(2,4-二磺酸)-2氫-四唑鹽,二鈉鹽),能夠和超氧陰離子反應(yīng)生成水溶性的染料,因此可以簡(jiǎn)便地進(jìn)行SOD的檢測(cè)。WST®-1與超氧陰離子反應(yīng)的劇烈程度比cytochrome C小70倍;因此,它的檢測(cè)靈敏度非常高,并且能夠通過(guò)將樣品用buffer稀釋?zhuān)贡尘暗奈舛然?br />

保存方式編輯室溫。低溫保存可能會(huì)有沉淀析出。如果發(fā)生析出現(xiàn)象,請(qǐng)于50℃溶解后,再于室溫保存。操作方法編輯全套操作約需1小時(shí),分勻漿、細(xì)胞裂解、除蛋白、DNA純化等步驟,詳細(xì)說(shuō)明如下。勻漿和細(xì)胞裂解:使用不同的實(shí)驗(yàn)材料需采用不同的勻漿步驟,具體說(shuō)明如下:【從動(dòng)物組織中提取基因組DNA】使用研缽進(jìn)行勻漿時(shí):① 取1~100 mg的動(dòng)物組織或人組織移入冰浴預(yù)冷的研缽中,快速用力展研成勻漿。注)下列組織請(qǐng)加液氮研磨至粉末狀。