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錫林凈化堅持品質(zhì)、效率與誠信,為客戶提供專業(yè)的實(shí)驗室服務(wù),對實(shí)驗室進(jìn)行工程設(shè)計/施工,包括醫(yī)l療工程/手術(shù)室/ICU工程/GMP制藥/生物制藥/實(shí)驗室凈化工程/化妝品/食品/醫(yī)l療器械凈化工程/電子無塵室工程等。
PCR實(shí)驗進(jìn)行條件:1、必須擁有標(biāo)準(zhǔn)的的PCR熒光實(shí)驗室;實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國AppliedBiosystems公司推出由于該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規(guī)PCR相比,它有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點(diǎn),目前已得到廣泛應(yīng)用。二、PCR實(shí)驗室工程的設(shè)計要點(diǎn):PCR實(shí)驗室可以是分散形式,也可以是組合形式。本文試就其定量原理、方法及參照問題作一介紹;
各實(shí)驗區(qū)之間的試用劑及樣品傳遞應(yīng)通過傳遞窗進(jìn)行。2.實(shí)驗室空調(diào)通:風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計及壓力控制PCR實(shí)驗室并沒有嚴(yán)格的凈化要求,但是為避免各個實(shí)驗區(qū)域間交叉污染的可能性直采用全送全排的氣流組織形式。⑹管子打開前都要簡短離心以減少氣溶膠的產(chǎn)生,而且管子不能用力崩開,這樣會產(chǎn)生氣溶膠。同時,要嚴(yán)格控制送、排風(fēng)的比例以保證各實(shí)驗區(qū)的壓力要求。2.1試用劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)該實(shí)驗區(qū)主要進(jìn)行的操作為貯存試用劑的制備、試用劑的分裝和主反應(yīng)混合液的制備。
在巢式PCR測定中,通常在一輪擴(kuò)增后必須打開反應(yīng)管,因此巢式擴(kuò)增有較高的污染危險性,第二次加樣必須在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。本區(qū)的壓力梯度要求為:相對于鄰近區(qū)域為負(fù)壓,以避免溶膠從本區(qū)漏出。為避免氣溶膠所致的污染,應(yīng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)的不必要的走動。頂板生產(chǎn)出廠時,其表面覆蓋有塑料薄膜以防止頂板在運(yùn)輸及安裝過程中造成損壞。個別操作如加樣等應(yīng)在超凈臺內(nèi)進(jìn)行。2.4擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū):該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為擴(kuò)增片段的測定。如使用全自動封閉分析儀器檢測,此區(qū)域可不設(shè)。本區(qū)是尤為主要的擴(kuò)增產(chǎn)物污染來源,因此對本區(qū)的壓力梯度的要求為:相對于鄰近區(qū)域為負(fù)壓,以避免擴(kuò)增產(chǎn)物從本區(qū)擴(kuò)散至其它區(qū)域。