巴氏染色液附著力更強(qiáng)、更潔凈、保質(zhì)期更長,粘貼牢固, 透明度好。能夠滿足各類組織、細(xì)胞等不同樣本、不同后續(xù)處理的粘附力及防脫要求??煽焖?、牢固的吸附組織和細(xì)胞;制片過程中吸附的細(xì)胞數(shù)量較多、分布均勻,耐受固定、染色、脫水、洗滌及其他等的各項(xiàng)處理,使粘附的細(xì)胞及組織在后續(xù)的處理過程中不易脫落或局部掉片,具有很好的制片效果;在濕潤的條件下也適用于處理易漂浮細(xì)胞。
為什么細(xì)菌染色液常用堿性染料?什么情況用酸性染料? 微生物染色的基本原理,是憑借物理要素和化學(xué)要素的效果而進(jìn)行的。物理要素如細(xì)胞及細(xì)胞物質(zhì)對染料的毛細(xì)現(xiàn)象、浸透、吸附效果等。化學(xué)要素則是依據(jù)細(xì)胞物質(zhì)和染料的不一樣性質(zhì)而發(fā)作地各種化學(xué)反應(yīng)。酸性物質(zhì)關(guān)于堿性染料較易吸附,且吸附效果安定;相同,堿性物質(zhì)對酸性染料較易于吸附。如酸性物質(zhì)細(xì)胞核關(guān)于堿性染料就有化學(xué)親和力,易于吸附??墒牵顾嵝晕镔|(zhì)染上酸性資料,有必要把它們的物理方式加以改動(如改動pH值),才利于吸附效果的發(fā)作。 相反,堿性物質(zhì)(如細(xì)胞質(zhì))一般僅能染上酸性染料,若把它們變?yōu)檫m合的物理方式,也相同能與堿性染料發(fā)作吸附效果。細(xì)菌的等電點(diǎn)較低,pH值大約在2—5之間,故在中性、堿性或弱酸性溶液中,菌體蛋白質(zhì)電離后帶陰電荷;而堿性染料電離時(shí)染料離子帶陽電。因而,帶陰電的細(xì)菌常和帶陽電的堿性染料進(jìn)行聯(lián)系。所以,在細(xì)菌學(xué)上常用堿性染料進(jìn)行染色。

巴氏染色液操作方法:
1、細(xì)胞涂片經(jīng)95%乙醇浸泡固定10分鐘?! ?
2、將已固定的涂片放入素染色液中浸泡5分鐘,后用水沖洗?! ?
3、將涂片浸入1%鹽酸酒精染色液分化數(shù)秒,水洗并浸泡2—5分鐘藍(lán)化。
4、將涂片浸入50%乙醇30秒,95%乙醇2分鐘?! ?
5、將涂片浸入橙黃染色液中浸泡1—3分鐘?! ?
6、將涂片在95%乙醇中浸洗2次
7、將涂片在EA50染色液中浸泡5分鐘。
8、將涂片在95%乙醇中浸洗2—3次,無水乙chun脫水,二透明,樹膠封片。
9、顯微鏡觀察。