基質(zhì)膠使用注意事項(xiàng)

       PHENODRIVE 作為一款人工合成的、非動(dòng)物源性的新一代細(xì)胞、組織培養(yǎng)用基質(zhì)膠（基質(zhì)凝膠），與傳統(tǒng)的自動(dòng)物體提取的基質(zhì)膠相比具有哪些優(yōu)勢(shì)呢？這里我們做一個(gè)簡(jiǎn)單、主要的總結(jié)如下:

傳統(tǒng)基質(zhì)膠

01 基本屬于動(dòng)物源性的產(chǎn)品；

02 可能含有非預(yù)期的、有害的外來(lái)污染物；

03 現(xiàn)有產(chǎn)品使用過(guò)程相對(duì)比較復(fù)雜；

04 存在生物化學(xué)和地形特征的批次間差異；

05 存儲(chǔ)不穩(wěn)定；

06 產(chǎn)品單一， 無(wú)法滿(mǎn)足用戶(hù)的需求；

07 重組層粘連蛋白和纖連蛋白僅適用于某些類(lèi)型的細(xì)胞， 不穩(wěn)定且昂貴；

08 部分產(chǎn)品只能在低溫條件下溶解，且較佳培養(yǎng)時(shí)間較短；

09 聚鳥(niǎo)氨酸通常與層粘連蛋白結(jié)合使用，主要限于神經(jīng)元細(xì)胞；

合成基質(zhì)膠

01 合成的非動(dòng)物源性的產(chǎn)品；

02 所有化學(xué)成分均可控；

03 使用非常方便， 水、乙醇、培養(yǎng)液等均可以溶解；

04 人工合成， 化學(xué)成分穩(wěn)定， 批次間一致性較好；

05 性能穩(wěn)定， 低溫可存儲(chǔ)至少12個(gè)月，紫外線(xiàn)照射不影響；

06 產(chǎn)品范圍較廣， 可滿(mǎn)足幾乎所有已知細(xì)胞系應(yīng)用需求；

07 可用于無(wú)培養(yǎng)；

08 適用于 2D 表面培養(yǎng)耗材、微孔支架以及直接加入培養(yǎng)液；

09 能夠模仿大多數(shù)組織的細(xì)胞外基質(zhì)或上皮和內(nèi)皮基底膜的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)；

10 能夠以高度受控的方式向細(xì)胞展示生物配體，無(wú)論是在間距還是密度方面；

11 能夠以受控和可的方式培養(yǎng)細(xì)胞并保留其表型而無(wú)需更改實(shí)驗(yàn)方案；

12 與現(xiàn)有的顯微鏡、成像技術(shù)以及常規(guī)的染色等應(yīng)用方案兼容；

13 在旋轉(zhuǎn)條件下懸浮形成3D細(xì)胞結(jié)構(gòu)， 或與其他生物材料結(jié)合用于3D打印;

問(wèn)：如何使用PHENODRIVE凍干粉末？

答：在乙醇或任何水介質(zhì)中溶解， 將基質(zhì)粉末稀釋至0.01mg/mL至0.1mg/mL的濃度，在pH值7.4 的無(wú)菌緩沖溶液中， 或在75% 乙醇（用于快速涂布）中并過(guò)濾。

問(wèn)：如何使用PHENODRIVE對(duì)96孔板或24孔板進(jìn)行涂布？

答：使用移液管將重組液注入各孔（96孔50微升， 24孔200微升）并在無(wú)菌條件下通過(guò)溶劑蒸發(fā)進(jìn)行實(shí)現(xiàn)涂層（建議紫外線(xiàn)照射環(huán)境）。蒸發(fā)時(shí)間將根據(jù)基質(zhì)、濃度和/或體積而變化， 并在干燥后進(jìn)行清洗。建議無(wú)接種細(xì)胞， 可在細(xì)胞粘附后（如播種后3小時(shí)左右）添加。這樣，靜電霧化技術(shù)的研究也為靜電紡絲體系提供了一定的理論依據(jù)和基礎(chǔ)。

PHENODRIVE凍干粉末的使用方法：

       與傳統(tǒng)的培養(yǎng)基質(zhì)膠相比， 我們的合成基質(zhì)膠使用過(guò)程極為簡(jiǎn)單， 在室溫下即可實(shí)現(xiàn)重組使用， 這里就 PHENODRIVE的標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用流程介紹如下:

       由于PHENODRIVE 是以無(wú)菌凍干粉末狀態(tài)進(jìn)行存儲(chǔ)的， 因此在使用時(shí)需要對(duì)其進(jìn)行重組。實(shí)驗(yàn)人員可以根據(jù)需求，取適量的粉末將其溶解進(jìn)水、乙醇或培養(yǎng)液中， 這個(gè)過(guò)程非常簡(jiǎn)單， 待其溶解后得到無(wú)色、透明液體經(jīng)過(guò)濾后即可準(zhǔn)備用于培養(yǎng) ， 這一過(guò)程即重組。重組后的液體可在-20℃ 的低溫下保存3至少3個(gè)月。但是，從科學(xué)基礎(chǔ)來(lái)看，這一發(fā)明可視為靜電霧化或電噴的一種特例，其概念可以追溯到1745年。

       對(duì)于這類(lèi)耗材表面的涂布應(yīng)用， 通常建議將PHENODRIVE 凍干粉末溶解進(jìn)75% 的乙醇中， 按要求的濃度進(jìn)行重組，基質(zhì)膠使用注意事項(xiàng)， 將經(jīng)過(guò)濾的重組溶液澆鑄在需要涂布的器皿表面，并在無(wú)菌的環(huán)境下讓其自然蒸發(fā)（建議紫外線(xiàn)照射的無(wú)菌環(huán)境下）， 待溶劑蒸發(fā)盡后， 即在器皿表面留下一層透明的薄膜，即完成涂布的過(guò)程。要想提高纖維在傳感器、催化等領(lǐng)域的應(yīng)用性能，通過(guò)制備具有多孔或中空結(jié)構(gòu)的納米纖維來(lái)提高纖維的比表面積是一種有效方法，但仍需進(jìn)一步的研究。

建議：在無(wú)情況下種植細(xì)胞， 待細(xì)胞粘附后再添加， 比如在細(xì)胞種植3小小時(shí)后。

       如果采用乙醇溶液進(jìn)行重組， 應(yīng)確保所使用的聚合物支架不溶于乙醇 。按照粉末重組步驟， 然后用移液器移取足夠的重組溶液將支架完全覆蓋， 同樣采用自然蒸發(fā)的方法在支架的表面及空期間形成一層透明的薄膜。

       溶解待培養(yǎng)細(xì)胞類(lèi)型的無(wú)組織培養(yǎng)基中的PHENODRIVE， 方法是按照粉末步驟配置適當(dāng)濃度的重組透明重組溶液，再將從組后的溶液與細(xì)胞懸浮液混合， 以達(dá)到0.001% ~1%（V/V）的終 PHENODRIVE 濃度。細(xì)胞懸浮液的典型細(xì)胞濃度是40000個(gè)/ml ~1000000個(gè)/ml。⑤靜電紡納米纖維具有較高的比表面積和孔隙率，可增大傳感材料與被檢測(cè)物的作用區(qū)域，有望大幅度提高傳感器性能。

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