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使用凍存袋的注意事項(xiàng)
1、使用凍存袋儲(chǔ)存樣本時(shí),嚴(yán)格要求應(yīng)把凍存袋放入液氮的氣相層或冰箱中保存!如果凍存袋儲(chǔ)存于液氮液體中,液氮有一定幾率會(huì)滲入凍存袋內(nèi)部,復(fù)蘇時(shí)液氮?dú)饣瘜?dǎo)致管內(nèi)外壓力不平衡,這樣極易造成凍存管的炸裂,并具有生物危害性。
2、凍存的樣本量不要超過(guò)凍存袋要求的大工作體積。
3、用畢暫時(shí)不再使用時(shí),應(yīng)洗凈并擦凈活栓,在活栓處應(yīng)墊一紙條,以防粘連。
凍存袋的應(yīng)用
對(duì)于需要保存5年以上的體外細(xì)胞的方法,CS250凍存袋供應(yīng)商,-196°℃的深低溫液氮保存簡(jiǎn)便,實(shí)用.凍存后的細(xì)胞損傷小活力高能保障患者移植后造血功能的早期恢復(fù),反之則導(dǎo)致造血功能恢復(fù)的延遲甚至失敗.原有的液氮罐保存方式是將裝有千細(xì)胞的凍存袋放入圓筒狀的容器中后,再放入液氮罐中保存,由于凍存袋與圓筒狀的容器形狀尺寸的不匹配冷凍保存時(shí)會(huì)造成凍存袋的變形導(dǎo)致千細(xì)胞被擠壓受損甚至消滅,且受液氮罐空間限制能凍存的數(shù)量有限.針對(duì)如何經(jīng)濟(jì),較大容量的保存細(xì)胞.
細(xì)胞凍存的方法
1.細(xì)胞:選對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞,收集細(xì)胞24小時(shí)前換液一次。
2.計(jì)數(shù):按常規(guī)方法把細(xì)胞制成細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù),令細(xì)胞密度達(dá)5×106/ml,離心去上清,吸入離心管中。
3.凍存液:先用培養(yǎng)液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO凍存液,按上法一滴滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。
4.分裝:分裝入無(wú)菌安剖中,200-074-400凍存袋報(bào)價(jià),每安剖加1.5毫升細(xì)胞懸液。
5.封口:用塑料安剖時(shí)擰緊瓶口即可;如用火焰封閉安剖口后,凍存袋,仔細(xì)檢查,定要封嚴(yán),必要時(shí)可浸入藍(lán)色液中觀察,為安全起見(jiàn),把安剖縫入紗布小袋中,CS250凍存袋批發(fā),以防液氮浸入后,融解時(shí)因受熱發(fā)生傷人;紗袋一端系以線繩,末端扎有小牌,注明:細(xì)胞名稱,凍存日期,以便日后查找。
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