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武漢思特進(jìn)(多圖)-亞細(xì)胞定位

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發(fā)布時(shí)間:2021-01-05 06:01  





武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。




洋蔥(Allium cepa L.)為百合科蔥屬2年生植物,可以加體,抑制,緩解,抵御,改善眼睛模糊,是一種營(yíng)養(yǎng)價(jià)值與*價(jià)值都很高的蔬菜。迄今,洋蔥在我國(guó)已廣泛栽培,但多年來(lái)連續(xù)重茬種植,加之氣候環(huán)境的影響,導(dǎo)致洋蔥鱗莖腐爛害發(fā)生廣泛,嚴(yán)重影響了洋蔥的產(chǎn)業(yè)發(fā)展與品質(zhì)性狀,降低了農(nóng)民的利益,洋蔥的抗病材料選育成為了急需解決的問(wèn)題。為此,本試驗(yàn)選取腐爛洋蔥為試材,分離致病菌,以形態(tài)學(xué)特征結(jié)合分子生物學(xué)方法鑒定其種類;利用人工接種鑒定方法篩選接種方案;對(duì)37份洋蔥材料進(jìn)行抗病性鑒定,從而為洋蔥的抗病育種提供參考,為洋蔥病害的防治提供依據(jù)。


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谷氨酰胺合成酶(GS; EC 6.3.1.2)是植物N素同化途徑中較為關(guān)鍵的催化酶之一,被稱為是植物中無(wú)機(jī)態(tài)N轉(zhuǎn)化為有機(jī)態(tài)N的“門戶”,對(duì)植物N素吸收、同化和利用效率(Nitrogen use efficiency)有著極為重要的影響。高等植物中的GS同工酶主要分為兩類:胞質(zhì)型GS1主要同化從土壤吸收的初級(jí)氨及再同化從植物體內(nèi)各個(gè)N循環(huán)途徑所釋放的氨;質(zhì)體型GS2同化由NO3--N還原而來(lái)及光呼吸過(guò)程所釋放的氨。N素供應(yīng)對(duì)甜瓜的生長(zhǎng)發(fā)育、果實(shí)的產(chǎn)量和品質(zhì)形成有非常重要的影響,目前甜瓜N素代謝研究還停留在N營(yíng)養(yǎng)生理與果實(shí)品質(zhì)及產(chǎn)量層面,在分子機(jī)理水平的研究報(bào)道很少,尤其是對(duì)與N素同化和利用效率緊密相關(guān)的GS酶基因的研究還是空白。因此,本文以甜瓜作為對(duì)象,在從甜瓜中出胞質(zhì)型GS基因M-GS1的基礎(chǔ)上,對(duì)M-GS1及課題組到的甜瓜質(zhì)體型GS基因M-GS2的基因組拷貝數(shù)、表達(dá)產(chǎn)物的亞細(xì)胞定位及生化特性、在甜瓜中的表達(dá)調(diào)控特征等進(jìn)行了研究和對(duì)比分析,從基因、蛋白質(zhì)和細(xì)胞水平對(duì)甜瓜GS基因進(jìn)行了系統(tǒng)的功能驗(yàn)證和鑒定,開展了甜瓜N營(yíng)養(yǎng)代謝的分子生理研究;進(jìn)而在植株水平研究M-GS1在轉(zhuǎn)基因超量表達(dá)后提高植株N素同化效率的潛能,為甜瓜GS基因的應(yīng)用、利用GS基因改良植物N素利用效率的研究提供新的材料和依據(jù)。


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目的研究1個(gè)白木香倍半萜合酶(ASS)的亞細(xì)胞定位,確定其功能區(qū)域,并比較3種瞬時(shí)表達(dá)體系在亞細(xì)胞定位研究中的優(yōu)劣。方法從白木香愈傷組織中提取總RNA,采用特異引物RT-PCR方法倍半萜合酶ASS基因,亞細(xì)胞定位,并連接于pEZS-NL載體和pFGC5941GFP改造載體上,分別構(gòu)建pFGC5941-GFP-ASS、pEZS-NL-ASS-GFP 2種植物表達(dá)載體,分別利用根癌農(nóng)侵染葉片、基因槍轟擊洋蔥表皮細(xì)胞、PEG轉(zhuǎn)化白木香原生質(zhì)體3種技術(shù)進(jìn)行瞬時(shí)轉(zhuǎn)化表達(dá),激光共聚焦顯微鏡下觀察表達(dá)出的綠色熒光蛋白(GFP)融合蛋白的亞細(xì)胞定位。結(jié)果在葉片表皮細(xì)胞、洋蔥表皮細(xì)胞及白木香原生質(zhì)體中,融合蛋白綠色熒光均能被觀察到。ASS基因與GFP的融合蛋白產(chǎn)物在葉片中定位于胞質(zhì),在洋蔥表皮中定位于胞質(zhì)和細(xì)胞核,白木香原生質(zhì)體中定位于胞質(zhì)和質(zhì)體。結(jié)論 ASS基因在白木香原生質(zhì)體胞質(zhì)及質(zhì)體定位;對(duì)3種體系的結(jié)果比較表明,應(yīng)用不同體系研究蛋白的亞細(xì)胞定位可能出現(xiàn)不同的結(jié)果,這可能與同源或異源表達(dá)的植物細(xì)胞的特性有關(guān)。

武漢思特進(jìn)(多圖)-亞細(xì)胞定位由武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司提供。武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司位于湖北省武漢市江夏區(qū)高新四路40號(hào)葛洲壩。在市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)的浪潮中拼博和發(fā)展,目前思特進(jìn)在辦公、文教項(xiàng)目合作中享有良好的聲譽(yù)。思特進(jìn)取得商盟認(rèn)證,我們的服務(wù)和管理水平也達(dá)到了一個(gè)新的高度。思特進(jìn)全體員工愿與各界有識(shí)之士共同發(fā)展,共創(chuàng)美好未來(lái)。

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