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親和層析的產(chǎn)生背景

殘留檢測的確證方法主要是儀器分析法,如LC-MS、GC-MS或HPLC,這些方法中因殘留組分量很小,檢測方法需要較高靈敏度和準確性。樣品前處理是檢測技術的核心,傳統(tǒng)的樣品凈化技術主要有液—液分配(LLE)、固相萃取(SPE)、基質(zhì)固相分散(MSPD)、超臨界萃取(SFE)等。但是這些凈化技術通常需要多個凈化步驟,缺乏選擇性,不但費時繁瑣、容易污染、損失樣本且會引起嚴重的本底干擾,降低結果的可靠性。因此建立有效的樣本凈化技術已成為痕量分析的主要問題。近20年,固相提取領域研究的不斷深入,推進了從分析物中選擇性萃取目標產(chǎn)物為目的的新技術發(fā)展(Hennion等,2003)。

親和柱——親和層析介紹

將具有特殊結構的親和分子制成固相吸附劑放置在層析柱中，當要被分離的蛋白混合液通過層析柱時，與吸附劑具有親和能力的蛋白質(zhì)就會被吸附而滯留在層析柱中。那些沒有親和力的蛋白質(zhì)由于不被吸附，直接流出，從而與被分離的蛋白質(zhì)分開，然后選用適當?shù)南疵撘?，改變結合條件將被結合的蛋白質(zhì)洗脫下來，這種分離純化蛋白質(zhì)的方法稱為親和層析。利用共價連接有特異配體的層析介質(zhì)分離蛋白質(zhì)混合物中能特異結合配體的目的蛋白或其它分子的層析技術。