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熒光顯微鏡的調(diào)節(jié)采用透射激發(fā)時,可以使用蘭色光線

熒光顯微鏡的調(diào)節(jié) 采用透射激發(fā)時，可以使用蘭色光線根據(jù)普通明場照明法進(jìn)行照明系統(tǒng)的調(diào)節(jié)，這包括光源調(diào)節(jié)及聚光鏡中心的調(diào)節(jié)。如果采用暗場聚光鏡，則還需要注意暗場聚光鏡的使用及調(diào)節(jié)方法，當(dāng)用蘭色光線調(diào)節(jié)好后，就可采用更換濾的方法，使標(biāo)本得到所需要的激發(fā)光線照射標(biāo)本，但要注意使遏止濾光片已在光路中，這樣可以保護(hù)觀察者眼睛免受紫外線損傷。 采用反射激發(fā)時，先在光路中加入綠色激發(fā)濾光片組，把照明可變孔徑光闌與視場光闌完全打開，調(diào)節(jié)光源位置，使照明光束通過物鏡轉(zhuǎn)換器的螺孔中央并使光源成象于物平面上，此時物鏡螺孔應(yīng)是通孔（不裝物鏡） 。在接觸時會明顯地看到浸油在物鏡下表面和蓋玻片上表面之間迅速地擴(kuò)散，然后用細(xì)調(diào)使物鏡緩緩下降，同時在目鏡上觀察，直到像出現(xiàn)并聚焦清晰。檢查激發(fā)光束是否通過物鏡螺孔中央，可在螺孔端面上放置半透明紙觀察光源光斑是否居中，在某些顯微鏡中，光源是在垂直面內(nèi)調(diào)節(jié)其上下左右位置，而光源成象是通過集光鏡沿軸方向移動來達(dá)到的。 在安裝光源時要注意光源表面不能沾污手指印及其他斑痕， 以免點(diǎn)燃過后， 難以清潔，因此，新安裝光源時，使用前燈殼表面可用紗布蘸上酒精等揩檫干凈，此外，還需要注意電極方向，根據(jù)光源要求進(jìn)行安裝，以免發(fā)生意外或點(diǎn)燃不亮，燈管應(yīng)裝入燈箱內(nèi)方可點(diǎn)燃，以防萬一傷人。 激發(fā)濾光片及遏止濾光片如何組合使用應(yīng)根據(jù)不同熒光標(biāo)本的激發(fā)方法進(jìn)行選擇，一般也可根據(jù)使用說明書推薦的配套方法進(jìn)行選用。

亮度的調(diào)節(jié)用集光器的孔徑光闡調(diào)節(jié)像的亮度是顯微鏡

亮度的調(diào)節(jié) 用集光器的孔徑光闡調(diào)節(jié)像的亮度是顯微鏡初學(xué)者常犯的錯誤之一，關(guān)閉孔徑光闌當(dāng)然會減少通過的光量，但是它相應(yīng)地改變了照明的光錐孔徑，并引起分辨力的損失和標(biāo)本上衍射現(xiàn)象的增大，因而會嚴(yán)重地影響像的質(zhì)量。 改變像亮度的方法是通過可變電阻調(diào)節(jié)燈變壓器上的電壓。當(dāng)這種調(diào)節(jié)不能使用時或?yàn)榱艘欢ǖ哪康臒舻碾妷罕仨毐３植蛔儠r（如在顯微分光光度計(jì)和彩色顯微照相中），像的亮度的終變化應(yīng)該使用濾光片來調(diào)節(jié)。我們還應(yīng)該提到ErnstAbbe，是他開始了光學(xué)定律的理論研究。 有經(jīng)驗(yàn)的觀察者在染色標(biāo)本中一般傾向于使用較低的亮度，當(dāng)然，過低亮度的昏暗像相應(yīng)地會降低像的清晰度（而不是分辨力），一定的細(xì)微結(jié)構(gòu)就可能不太清晰。在用單目鏡筒觀察時，太低亮度的像將會促使觀察者疲勞并引起。但是，較暗的像對于觀察末染色的標(biāo)本是有利的，這種未染色標(biāo)本的反差主要取決于邊界上的衍射，這時集光器的孔徑光闌應(yīng)該處于比染色標(biāo)本關(guān)閉更小的位置上。正如在光源中所討論的，常用的低壓鎢燈在光譜的發(fā)射分布中大部分處于較長的波長范圍，這些波長較長的紅光睛來說是可見的，但是對于像的形成卻是沒有多大用處的。

聚光鏡的調(diào)節(jié)

聚光鏡的調(diào)節(jié) 1、調(diào)節(jié)聚光鏡光軸與顯微鏡光軸重合。如果聚光鏡光軸偏離中心，則照明不均勻，將導(dǎo)致顯微鏡分辨率下降。對于一些簡單的學(xué)生用顯微鏡如直筒顯微鏡，聚光鏡是固定式的，光軸已在裝配時予以調(diào)整好。但對于一些較復(fù)雜的顯微鏡，為了滿足不同顯微術(shù)的要求，聚光鏡做成可以調(diào)節(jié)的。 調(diào)節(jié)方法：載物臺上置一標(biāo)本，對標(biāo)本進(jìn)行調(diào)焦，然后縮小聚光鏡的光闌孔，拔去目鏡，在目鏡筒端面套一紙罩，中心戳一小孔，用眼睛通過小孔向鏡筒中觀察，可以看到縮小了的可變光闌孔（多邊形）與物鏡的孔徑光闌孔（圓孔） ，旋轉(zhuǎn)調(diào)中螺絲，使可變光闌孔與物鏡的光闌孔同心，打開可變光闌，插上目鏡，若視場內(nèi)照明不均勻，則可重新調(diào)節(jié)反光鏡。直到19世紀(jì)中期，顯微鏡技術(shù)得到跳躍性的提升，逐漸有了現(xiàn)代顯微鏡的特性。 2、聚光鏡上下的調(diào)節(jié)。低倍觀察時，應(yīng)降下聚光鏡，使照明光束充滿視場；高倍觀察時，應(yīng)使聚光鏡升到上端。 3、聚光鏡可變光闌的調(diào)節(jié)。可變光闌的調(diào)節(jié)對象的反差有明顯的影響，不正確的使用常是導(dǎo)致象對比度下降或分辨率下降或顏色失真的原因。 把目鏡從鏡筒上取下來，用眼睛直接觀察可變光闌，調(diào)節(jié)可變光闌孔的大小，使可變光闌的大小為物鏡光闌的 2/3～3/4，為恰當(dāng)。