【廣告】
Arf6激l活測定。 經(jīng)GDP(lane1)或GTPγS(lane 2)處理后,純化的Arf6蛋白被免l疫沉淀。 用抗活性Arf6單克l隆抗l體進行免l疫沉淀。
武漢紐斯特生物科技有限公司(WuhanNewEastBiotechonologyCo.Ltd),系美國生命科學(xué)試劑供應(yīng)商美國NewEastBio在中國的子公司。美國NewEastBio專注于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域,主要產(chǎn)品有小分子、ELISA試劑盒、蛋白等,與世界高校和研究所、世界大制藥公司、生物科技公司和醫(yī)院等客戶建立了長期穩(wěn)定的合作關(guān)系,產(chǎn)品銷往全球。
所需但未提供的材料
1.刺激的和非刺激的細胞裂解液
2.蛋白酶抑制l劑
3. 4°C管搖桿或搖床
4. 0.5 M EDTA,pH8.0
5. 1 M氯化鎂
6. 2倍還原SDS-PAGE樣品緩沖液
7.電泳和免l疫印跡系統(tǒng)
8.免l疫印跡洗滌緩沖液,例如TBST(10 mM Tris-HCl,pH 7.4,0.15 M NaCl,0.05%
吐溫20)
9.免l疫印跡封閉緩沖液(TBST包含5%脫脂奶粉或3%BSA)
10. PVDF或硝l酸纖維素膜
11.二抗
12. ECL檢測試劑
試劑準備
?1X測定/裂解緩沖液:短暫混合5X儲備液,并在去離子水中稀釋至1X。 就在
用法中,添加蛋白酶抑制l劑,例如1 mM PMSF,10 μg / mL亮肽素和10 μg / mL抑肽酶。
Gα13活化試驗。MEF細胞分別用LPA(第2道)或不加LPA(1道)處理。細胞裂解物用抗活性Gα13單克l隆抗l體(Cat)孵育。#26902)(頂面板)。這個用抗Gα13兔多克l隆抗l體(Cat)免l疫印跡法檢測沉淀活性Gα13#21005年)。底部的面板顯示了用抗Gα13的細胞裂解物的Western blot(5%在頂部面板中使用的)。