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核酸試劑盒
LAMP:環(huán)介導等溫擴增法的特征是針對目標DNA鏈上的六個區(qū)段設計四個不同的引物然后再利用鏈置換反應在一定溫度下進行反應。反應只需要把基因模板、引物、鏈置換型DNA合成酶、基質等共同置于一定溫度下(60~65℃)、經一個步驟即可完成。
重組酶與引物結合形成的蛋白-DNA復合物,能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就會發(fā)生鏈交換反應形成并啟動 DNA合成,對模板上的目標區(qū)域進行指數(shù)式擴增。被替換的 DNA鏈與SSB結合,防止進一步替換。在這個體系中,由兩個相對的引物起始一個合成事件。
等溫核酸試劑盒
RPA技術犀利在何處
常規(guī)PCR必須經過變性、退火、延伸三個步驟,而PCR儀本質上就是一個控制溫度升降的設備。RPA反應的溫度在37°C - 42°C之間,無需變性,在常溫下即可進行。這無疑能大大加快PCR的速度。此外,由于不需要溫控設備,RPA可以真正實現(xiàn)便攜式的快速核酸檢測。據介紹,RPA檢測的靈敏度很高,能夠將痕量的核酸(尤其是DNA)模板擴增到可以檢出的水平,從單個
模板分子得到大約1012擴增產物。而且RPA還用不著復雜的樣品處理,適用于無法提取核酸的實地檢測。
數(shù)字PCR技術是第三代PCR技術,是一種核酸分子定量的檢測方法。現(xiàn)階段,核酸分子的定量有三種方法:光度法基于核酸分子的吸光度來定量;實時熒光定量PCR基于Ct值,即指可以檢測到熒光值對應的循環(huán)數(shù);數(shù)字PCR作為新定量技術,主要采用當前分析化學熱門研究領域的微流控或微滴化方法,借助專門設備將50微升左右核酸溶液樣本大量稀釋后,分割成了近10萬個液滴分散至芯片的微反應器或微滴中,單一液滴為獨立反應單元,每個反應器的核酸模板數(shù)少于或者等于1個。