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低溫生物菌種怎么保藏
菌種保藏(culture preservation,culture collection)是指保持微生物菌株的生活力和遺傳性狀的技術(shù)?;蚪?jīng)人工選育得到的變異型純種,使其存活、不丟失、不污染雜菌、不發(fā)生或少發(fā)生變異,保持菌種原有的各種特征和生理活性?;驹硎鞘刮⑸锏纳顒?dòng)處于休眠狀態(tài),也就是使微生物的新陳代謝作用限制在低范圍內(nèi)。干燥、低溫和隔絕空氣是保證獲得這種狀態(tài)的主要措施。有針對(duì)性地創(chuàng)造干燥、低溫和隔絕空氣的外界條件,就是微生物菌種保藏的基本技術(shù)。常用的方法有凍干保藏法、深低溫保藏法、液氮保藏法、礦油封藏法、固體曲保藏法、砂土管保藏法、瓊脂穿刺保藏法等。日常工作中,常選用4℃冰箱進(jìn)行短時(shí)間的菌種保藏
細(xì)菌一般在什么溫度下不能存活?
細(xì)菌一般在什么溫度下不能存活?高至100攝氏度以上,低至-20攝氏度以下。
細(xì)菌也對(duì)人類活動(dòng)有很大的影響。一方面,細(xì)菌是許多疾病的病原體,砂眼等疾病都是由細(xì)菌所引發(fā)。
然而,人類也時(shí)常利用細(xì)菌,例如乳酪及酸奶和酒釀的制作、廢水的處理等,都與細(xì)菌有關(guān)。在生物科技領(lǐng)域中,細(xì)菌有也著廣泛的運(yùn)用。
細(xì)菌早期是被荷蘭人列文虎克在一位從未刷過(guò)牙的老人牙垢上發(fā)現(xiàn)的,但那時(shí)的人們認(rèn)為細(xì)菌是自然產(chǎn)生的。直到后來(lái),巴斯德用鵝頸瓶實(shí)驗(yàn)指出,細(xì)菌是由空氣中已有細(xì)菌產(chǎn)生的,而不是自行產(chǎn)生,并發(fā)明了“巴氏消毒法”,被后人譽(yù)為“微生物創(chuàng)始人。
低溫生物菌種的保存方法有哪些?
(一)培養(yǎng)基保存法
利用各種斜面和半固體培養(yǎng)基,加上石蠟油保存菌種,是一種簡(jiǎn)易的保存方法。
1.普通瓊脂斜面保存法:腸道菌、等一般細(xì)菌可接種于不含糖的普通瓊脂斜面上,斜面底部應(yīng)加少許無(wú)糖肉膏湯,以防干涸。經(jīng)35℃培養(yǎng)18~24h后,移種于4℃冰箱中,一般可保存一個(gè)月,每月傳代一次。
2.血液瓊脂斜面保存法:鏈球菌、應(yīng)接種于血液瓊脂斜面上,35℃培養(yǎng)生長(zhǎng)后,置4℃冰箱中保存,鏈球菌須半個(gè)月至1個(gè)月移種一次,新分離菌株須2~4天移種一次,以后逐漸延長(zhǎng)移種時(shí)間,在適應(yīng)后可延至半個(gè)月移種一次。
3.巧克力色斜面保存法:宜保存菌,并在35℃孵箱中保存,一般每2天移種一次。
4.雞蛋斜面保存法:適于保存含有Vi抗原的沙門菌屬及其他含表面抗原的細(xì)菌,一般可保存一個(gè)月。
5.半固體穿刺保存法:將細(xì)菌接種于瓊脂半固體或瓊脂半固體內(nèi),經(jīng)35℃培養(yǎng)18~24h,再以無(wú)菌方法加入滅菌的液體石蠟。高度約lcm,置4℃冰箱保存。保存時(shí)間可達(dá)3~6個(gè)月。
(二)干燥保存法
原理是將細(xì)菌體內(nèi)的水分蒸發(fā)掉,使其處于休眠和代謝停滯狀態(tài),從而達(dá)到長(zhǎng)期保存菌種的目的醫(yī)|學(xué)教|育網(wǎng)搜集整理。菌種干燥后低溫保存,可保存數(shù)年至十幾年。
(三)冷凍干燥保存法
本法又稱冷凍真空干燥法。它綜合利用了各種有利于菌種保存的因素(低溫、干燥和缺氧等),是目前有效的菌種保存方法之一。用本法保存的菌種具有成活率高,變異性小等優(yōu)點(diǎn),保存期一般3~5年,有的可長(zhǎng)達(dá)10年以上。
(四)脫脂牛奶保存法
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低溫生物菌種了解多少?
研究在低溫條件下生命活動(dòng)的生物化學(xué)規(guī)律的新興學(xué)科,是低溫生物學(xué)的重要基礎(chǔ)。例如,在某些冬眠狀態(tài)的昆蟲體液中,甘油含量可高達(dá)25%,以致在-35℃的狀況下也不會(huì)冰凍。另一方面,利用低溫下變化減慢,來(lái)研究在常溫下變化較快的一些生物化學(xué)反應(yīng)。如在酶的催化、蛋白質(zhì)和核酸在溶液中的空間構(gòu)象變化中。某些中間變化常溫下在千分之一秒的時(shí)間內(nèi)即可完成,用一般方法難以探討,而在含有添加劑使溫度降至-40℃左右的溶液中,反應(yīng)速度大為減慢就可用常規(guī)方法進(jìn)行研究。